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慢病毒载体质粒测序验证----------急救!!!!!
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sunnjjian
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注册: 2011-03-19
性别: GG
专业: 水产生物遗传育种学
[
求助
]
慢病毒载体质粒测序验证----------急救!!!!!
已有2人参与
各位大神,要做慢病毒干扰实验,找别人要了一点相关质粒,对U6启动子进行验证后发现,没有突变,但是U6上游和下游的一些序列有缺失,我想问的是,骨架序列的突变会不会影响病毒的包装,万一影响到了荧光蛋白的表达那可咋整???????
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1楼
2015-03-16 17:24:20
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lijie6054
新虫
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(幼儿园)
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虫号: 973061
注册: 2010-03-16
专业: 肿瘤生物治疗
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
楼主,有几个问题需要问一下:第一,你测U6的时候是怎么测的?测通了没有?第二,你测的这个U6是放在哪个位置的?第三,您的病毒是准备要包装,还是已经包装好了?如果病毒已经包装好了,直接感染一下,看看有没有干扰效果。只要有干扰效果,荧光不影响后续实验,问题不大。如果病毒尚未包装,你需要仔细分析一下这部分缺失到底在哪里,是否影响病毒骨架蛋白的表达。另外,有时候也会影响干扰序列的干扰效率。给楼主加油!
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3楼
2015-03-16 19:09:23
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kuaile5420
专家顾问
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在线: 221.8小时
虫号: 1836826
注册: 2012-05-27
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学
管辖:
生物医药区
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
这个实验要做多久?要是时间不长的话,就是用这种质粒做一下实验,可以当做预实验。要是实在不放心就再换些质粒。
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坚持到底就是胜利!
2楼
2015-03-16 18:05:43
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