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刘莹220

金虫 (小有名气)

[交流] 有关于DAPI染色的问题 已有4人参与

我现在在养Hela细胞,并使用药物对肿瘤细胞实现治疗,最后用DAPI进行染色,想问在用DAPI对细胞染色之前,细胞培养液用不用吸走,还用不用PBS进行清洗呢,如果不吸走细胞培养液对细胞染色会不会有影响呢
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conanzzz

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果你的药物不跟DAPI反应的话应该就没影响
2楼2015-02-04 12:59:33
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刘莹220

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by conanzzz at 2015-02-04 12:59:33
如果你的药物不跟DAPI反应的话应该就没影响

奥,谢谢,那 DAPI一般得染色多久呢
仰望星空,脚踏实地!
3楼2015-02-04 15:49:25
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conanzzz

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 刘莹220 at 2015-02-04 15:49:25
奥,谢谢,那 DAPI一般得染色多久呢...

15-30分钟,看浓度高低了
4楼2015-02-04 17:56:02
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刘莹220

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by conanzzz at 2015-02-04 17:56:02
15-30分钟,看浓度高低了...

好的,我试试
仰望星空,脚踏实地!
5楼2015-02-04 20:51:30
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安安静静的

新虫 (初入文坛)

没影响
6楼2015-02-05 01:34:54
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刘莹220

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 安安静静的 at 2015-02-05 01:34:54
没影响

好的,还想请教一下,在细胞培养板上该如何用PBS清洗细胞呢,我上次用移液枪清洗后,细胞都洗没了,我培养的是Hela细胞,还想问一下DAPI染色之后,用不用清洗一下呢?(用PBS洗DAPI)
仰望星空,脚踏实地!
7楼2015-02-05 08:40:11
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monroelml

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 刘莹220 at 2015-02-05 08:40:11
好的,还想请教一下,在细胞培养板上该如何用PBS清洗细胞呢,我上次用移液枪清洗后,细胞都洗没了,我培养的是Hela细胞,还想问一下DAPI染色之后,用不用清洗一下呢?(用PBS洗DAPI)...

用PBS洗之前有没有固定细胞呢?没有固定细胞的话,细胞在PBS里泡久了也会离壁的。另外加PBS的时候不要直接加到细胞表面上,要从细胞板壁上加PBS,速度慢一些。DAPI染色完最好清洗一下,要不然显微镜观察时有干扰。
8楼2015-02-09 13:12:58
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刘莹220

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by monroelml at 2015-02-09 13:12:58
用PBS洗之前有没有固定细胞呢?没有固定细胞的话,细胞在PBS里泡久了也会离壁的。另外加PBS的时候不要直接加到细胞表面上,要从细胞板壁上加PBS,速度慢一些。DAPI染色完最好清洗一下,要不然显微镜观察时有干扰。...

好的 我试试
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9楼2015-02-10 09:16:02
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ting24

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
需要吸走,吸走之后再用PBS洗,洗完再加稀释了的DAPI进行染色
10楼2015-07-25 10:11:45
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