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小慢慢cealin

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-30 20:03:30
U6,cel-miR-39 , miR-16,,还有用总RNA量或体积做内参的,我用β-actin...

哦哦!Thank you !
11楼2015-02-01 17:46:44
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小慢慢cealin

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2015-01-30 20:03:30
U6,cel-miR-39 , miR-16,,还有用总RNA量或体积做内参的,我用β-actin...

你好!我向公司订购mir-16引物,他们问我3‘端引物用mir-16-1呢?还是mir-16-2呢?你当时用的什么呢,谢谢!
12楼2015-02-12 15:44:29
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xiao159357

新虫 (初入文坛)

Ambion的试剂不错
13楼2015-04-24 12:24:50
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摩天轮711

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
我们做组织及细胞的microRNA用的U6,做血浆/血清的miRNA的内参文献报道各家不一,大多是用的syn-cel-miR-39 spike-in control, miR-16,极少数用U6,还有用总RNA量或体积做内参的。天根的KIT好像用5S做内参,你也可以询问一下其他KIT用的什么内参,QIAGEN啊 BIODAI啊,其实目前针对血液miRNA仍无有效的内参,正在研究中。
14楼2018-12-21 09:42:19
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

以自己的经验来看,血清中的rna含量很低的,不是很好提的,提取用过的试剂盒中就biog,天根的不错,价格上biog的便宜些,经费允许的话,就随意。
15楼2018-12-25 15:33:38
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吃瓜的半仙

新虫 (小有名气)

micro rna不稳定,极易被广泛存在的核酸酶降解,所以提取起来并不容易,之前提大鼠血清mirna时,有用过biodai的,OD值在1.7,下游也做了qpcr检测,ct值在25-29。
16楼2018-12-27 14:33:39
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