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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母在BMGY培养基中总是污染，请问该如何解决？
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王娜dada

铁虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母在BMGY培养基中总是污染，请问该如何解决？已有3人参与

准备做发酵种子液，毕赤酵母在BMGY培养基中培养时总是污染。从电转后二次划线的PAD培养基上挑取单克隆，加入装有5 mL BMGY的三角瓶内，用透气膜封口后摇培48 h后进行镜检，在40倍镜头下可以看到很多游动的菌（介于杆状与蝌蚪状之间，游动幅度比较大）基本看不到酵母，做过好几次一直都是这样，有时候能闻到刺鼻的臭味，但绝对不是酵母的那种酒香，有的时候基本上闻不到什么味道。色泽上都是基本都是乳白色，或者黄色，静置之后摇瓶底部会有沉淀。请问这是什么菌？怎么造成的污染？
我的培养基配制过程都是按照之前做摇瓶表达时所用的配制以及灭菌方式，操作上也没什么问题。而且我的阴性对照（单纯的BMGY培养基，没有挑入菌落）并没有长菌，镜检时也没有看到杂菌。
这种污染的状况出现了好多次，根本没有办法继续下游的发酵，还望各位帮帮忙！多谢！
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王娜dada

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选择了，就走下去。
1楼2015-01-29 08:48:51
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王娜dada

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
顶一下！！求帮忙！！
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选择了，就走下去。
4楼2015-02-02 08:44:41
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lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我跟楼主做的差不多，不过用BMGY培养，摇菌状态像豆腐渣一样，重复好多次都是一样的结果。。。。
赞一下 回复此楼
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2015-01-29 10:28:58
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王娜dada

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2015-01-29 10:28:58
我跟楼主做的差不多，不过用BMGY培养，摇菌状态像豆腐渣一样，重复好多次都是一样的结果。。。。

最后有没有解决呢？
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选择了，就走下去。
3楼2015-01-29 17:50:45
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沙暴我爱罗0

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励热心交流！ 2015-02-03 16:34:21
我认为可能是一些小细节出了问题：1，三角瓶没有洗净（先洗净，灭菌，再来摇，这个其实很重要）。2，为什么一定要用透气封口膜封口？试试用透气棉塞加报纸灭菌后来养着试试。3，一定就确定从PDA平板上挑的是纯酵母单克隆？为什么不先挑点用油镜看看有没有细菌？
如果你想知道污染菌株是什么，简单，离心菌液，提点细菌DNA，16SrDNA P出来测个序，你就知道是什么细菌了。
只是胡乱说说，我不是做酵母的，原谅我在关公面前耍大刀。
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nopainsnogains
5楼2015-02-03 00:57:27
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