24小时热门版块排行榜    

查看: 1464  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hqj200808

铜虫 (小有名气)

[求助] HPLC分析一种类胡萝卜素的问题 已有6人参与

前两天用HPLC分析了一种类胡萝卜素,选用的流动相为:A为乙腈-水(9:1,v/v);B为乙酸乙酯;所分析的物质为弱极性物质,不知此种流动相是否合理?
另外,样品为经过硅胶柱层析所得样品,硅胶柱为95%的乙醇湿法上柱,洗脱液用的也是95%的乙醇。有两个问题不大明白:
1,洗脱液是否需与装柱的溶剂相同?(比如用乙醇上柱,以其他混合试剂洗脱,这样是否会使收集的目标物质溶于不同的溶液中?)
2,将物质洗脱下来后,转移至容量瓶定容的溶剂有什么要求?是洗脱剂还是溶解标品的溶剂?刚做实验,还望知情的虫虫帮忙解答下。不慎感激。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smww

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西湖醉鱼: 金币+2, 欢迎常来分析版 2015-01-27 23:53:33
一般都是乙腈和水,c18的反相柱子,5%的乙腈起始一直到100%乙腈,3D扫描就能看到最大吸收波长了。
12楼2015-01-27 19:18:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

匿名

用户注销 (知名作家)

精修问题可私信


感谢参与,应助指数 +1
本帖仅楼主可见
2楼2015-01-25 16:48:03
已阅   申请ACI   回复此楼   编辑   查看我的主页

hqj200808

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lich666 at 2015-01-25 16:48:03
HPLC用的是正向柱还是反相柱?反相柱没听过用乙酸乙酯走的。。。

用的C18柱,应该属于反相色谱柱了,流动相A与B 线性梯度洗脱,B在20min 从0%-100%。我也觉得奇怪,查资料好像都说乙酸乙酯用于正相色谱的,但不晓得梯度洗脱是否有不同。结果就是出现柱压过高  样品也没跑出来
3楼2015-01-25 20:46:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

archbishop

禁虫 (职业作家)

优秀版主

我只能说用乙酸乙酯是不合理的。
雲幕低垂映桂子,江月留白問柳心。
4楼2015-01-25 20:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见