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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 一些关于DGGE的问题 求大神指教呀！ 急急急！！！！
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灬天使

新虫 (初入文坛)

[求助] 一些关于DGGE的问题 求大神指教呀！ 急急急！！！！ 已有5人参与

最近刚刚开始接触DGGE 快折磨疯了   按照文献上 120V 6h 扩增细菌的16s V3区 引物带GC夹的… 胶 40% 60% 上样6x loading 去10微升+ PCR样本 10微升  为什么在最后银染的时候 什么条带都没有呢 银染也是按照文献上的来的 固定 染色 显色 冲洗 最后 照相  还有想问问大家 一般银染完之后再自然状态下就能看见条带吗？  需要在凝胶系统的紫外下看吗？  还是我做的过程中有什么问题呢！大家一般怎么染色呢 我看有用EB和GreenI的   求大神指导！！ 啊啊啊啊啊啊  折磨死了！！！！
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1楼 2015-01-24 21:41:26
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灬天使

新虫 (初入文坛)
真是没有人理呀！
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2楼2015-01-25 08:48:28
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-25 13:21:36
应该在有紫外的等下看吧，一些aflp、qtl等都是跑完在紫外瞎看的
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3楼2015-01-25 09:45:50
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爱睡猪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-25 13:21:44
直接用GREEN 染20min，拿出来直接照的都有
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ControlMyself
4楼2015-01-25 10:58:04
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灬天使

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2015-01-25 10:58:04
直接用GREEN 染20min，拿出来直接照的都有

噢噢 谢谢 用其他的EB替代染料可以吗？ 在紫外下照吗？ 下面用放白扳吗？
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5楼2015-01-25 11:37:33
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灬天使

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-25 09:45:50
应该在有紫外的等下看吧，一些aflp、qtl等都是跑完在紫外瞎看的

噢噢  那下边用放白板吗？
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6楼2015-01-25 11:39:26
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anney1007

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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直接EB染啊，条带清楚得多，注意防护就好了
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7楼2015-01-26 17:32:39
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DoRbIr

金虫 (正式写手)
说实话，DGGE技术要淘汰了。对了，你银染的时候注意避光了吗？
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8楼2015-01-26 18:04:16
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korchagin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DGGE确实是已经被淘汰了，你试试genefinder这个染料吧，我以前用的是这个
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9楼2015-01-27 14:14:04
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灬天使

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by DoRbIr at 2015-01-26 18:04:16
说实话，DGGE技术要淘汰了。对了，你银染的时候注意避光了吗？

一定要避光吗？？？
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10楼2015-01-27 19:29:30
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