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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » RCA中封闭的圆形模板的问题
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yanzihuaxue

铜虫 (小有名气)

[求助] RCA中封闭的圆形模板的问题 已有1人参与

求大神解答，RCA中使用的封闭的环状模板，是每次用之前连接呢？还是可以一次连接制备好，然后-20℃保存？ 如果后者，大约可以保存多长时间？谢谢。谢谢
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1楼 2015-01-22 16:23:37
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by yanzihuaxue at 2015-01-23 15:07:55
就是，制备好，还可以用TE稀释，在-20℃保存就行，还想问你，这样制备出来封闭的环的浓度跟起始的加入的模板的浓度差会不会很大...

你是河大的么。。呵呵，你在成环以后需要把你的环纯化一下，然后用凝胶洗脱液把你的环洗脱出来，然后用TE稀释，稀释完以后，用nanodrop或者紫外可见分光光度计对你的环进行定量，这样，即使浓度差的很大，你也知道你的环的量，至于你得到的环的量，与用的连接酶和你的实验手法有关系
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激浪青春！
4楼2015-01-23 19:33:53
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yz2007433052

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2015-01-23 13:48:34
yanzihuaxue: 金币+5 2015-01-23 15:06:04
可以一次链接制备好，然后每次再用，保存在TE buffer中，-20℃条件下应该非常稳定，一个月没问题
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激浪青春！
2楼2015-01-22 19:56:37
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yanzihuaxue

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yz2007433052 at 2015-01-22 19:56:37
可以一次链接制备好，然后每次再用，保存在TE buffer中，-20℃条件下应该非常稳定，一个月没问题

就是，制备好，还可以用TE稀释，在-20℃保存就行，还想问你，这样制备出来封闭的环的浓度跟起始的加入的模板的浓度差会不会很大
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3楼2015-01-23 15:07:55
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