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名白纸号白纸

银虫 (小有名气)

[求助] 提取总RNA后,反转录在PCR扩增,条带大小不符合要求? 已有5人参与

如题。要扩1000左右的片段,结果出来一个500左右的片段?还请各位前辈救急啊 。。
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
名白纸号白纸: 金币+6, 有帮助 2015-01-23 16:50:41
首先确定胶的质量,其次确定marker显示的是否是对的。这两者没有问题在考虑下面的因素。
楼主可以上个图来看看你=,比较直观一点。
如果500bp的那个确实不是你想要的产物的话,说明你的产物完全没有扩增出来,所以,先确定模板有没有降解(没有模板,扩增出来的当然只有引物二聚体啊),第二,引物的设计是否合理,最后考虑你的酶(普通Taq酶活是热启动聚合酶),一一分析,得出结论
todayisdifficult,tomorrowismoredifficult,butthedayaftertomorrowisbeautiful
13楼2015-01-23 10:31:29
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781055707

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 20:58:37
测序看看吧。要不换个MARK。
采菊东篱下,悠然见南山。
2楼2015-01-21 17:09:02
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2015-01-21 20:58:43
可以先克隆出来测序看是什么,或者需要从设引物。
永远相信未知的总是美好的!
3楼2015-01-21 17:47:18
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先看看批出来的是什么
4楼2015-01-21 22:50:03
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