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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 过完NI柱，目的蛋白没有了
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lijing1212

禁虫 (初入文坛)
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1楼 2015-01-21 10:59:52
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JC.dhy8187

新虫 (初入文坛)
★
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你确定那是杂带而不是你蛋白的降解带么。洗脱本来就是一个稀释的过程，再加上蛋白的损耗，降解。
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3楼2015-01-21 23:01:54
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pnkyh

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我刚开始学做镍柱纯化，也不是很懂，确定原来的裂解液中的是目的蛋白吗？跟镍柱结合后有木有取一点柱料和结合完后滤下的裂解液，跑个胶看看目的蛋白是完全结合上了镍柱还是有一部分仍然在流出液中？结合后的流出液一般再过两遍镍柱的话会结合得比较充分，有时pH也会影响结合的。也有时目的蛋白还有一部分在柱子上弄不下来的，这样elute下来的就会比较少。
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2楼2015-01-21 14:45:55
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