24小时热门版块排行榜    

查看: 2933  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

梦回年少

木虫 (正式写手)

[求助] 金纳米粒子吸附DNA操作顺序 已有2人参与

各位虫友:
    我在做金纳米粒子上以poly A为锚,吸附DNA,但对加料顺序不是很确定,现在做的是金纳米溶液和DNA混,孵育后,再加PBS(不含NaCl),再孵育一段时间,并逐步加浓的NaCl溶液至所需浓度。但从紫外上看吸收峰峰强会降低很多。是不是加料顺序有问题?各位都是怎么操作的呢?金纳米在溶液中稳定存在、且DNA吸附效果较好的的NaCl浓度是多少呢?DNA吸附量降低是否要相应降低NaCl的浓度?
    还有就是想问一下大家,吸收峰位置的变化到底是由粒径变化导致的,还是吸附后介电常数发生变化导致的,或者两者兼而有之?
    老师也没做过这块,希望各位做这个方向的虫友帮帮忙,先谢谢大家了~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 梦回年少 at 2015-01-15 21:39:36
我是准备做不同poly A长度的,加上spacer和probe,总共最短的也要有43-mer,这种条件下是不是考虑要增大盐浓度以增加吸附效率,一次加的盐浓度是不是不可以太高?...

可以适当增大盐浓度,但一般来说,大到一定程度再增加就没有什么意义了,你可以做个实验看看最大吸附时的盐浓度大概是多少,盐浓度太高也不好,会引起纳米金的沉淀,这可能与我们是直接把纳米金加到DNA盐溶液里有关。另外可以降低溶液的pH,这个效果很好。你自己也可以把加料顺序改变下看看效果,别人怎么说都不如你自己试下好。
7楼2015-01-16 16:05:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
50~60 mM NaCl 可以吸附得比较好。把DNA先加到盐溶液里,再加纳米金。
2楼2015-01-14 21:57:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦回年少

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2015-01-14 21:57:11
50~60 mM NaCl 可以吸附得比较好。把DNA先加到盐溶液里,再加纳米金。

谢谢~我看文献里是可以做到300mM重悬的,也有说是先加完PBS(不含NaCl),之后逐步加盐的,说是屏蔽电荷,降低DNA间的静电排斥,可以使吸附量增大。您说50~60 mM可以吸附的很好,那吸附量是足够大的么?DNA加到盐溶液里是一步都加进去?
3楼2015-01-15 15:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
梦回年少: 金币+5 2015-01-15 21:32:52
引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦回年少 at 2015-01-15 15:55:59
谢谢~我看文献里是可以做到300mM重悬的,也有说是先加完PBS(不含NaCl),之后逐步加盐的,说是屏蔽电荷,降低DNA间的静电排斥,可以使吸附量增大。您说50~60 mM可以吸附的很好,那吸附量是足够大的么?DNA加到盐溶 ...

其实吸附过程影响因素很多,DNA的长度、纳米金的大小、溶液的pH都会造成影响。据我所知,如果是用氯金酸和柠檬酸合成的纳米金,粒径大小在13nm左右,DNA的长度为12-mer,pH 7.6,在这种条件下,50~60 mM NaCl基本就吸附饱和了。pH越低、盐浓度越高,吸附越容易。DNA越长吸附越慢,但吸附后解吸也越难。
4楼2015-01-15 18:42:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 澳大利亚 Murdoch University 全奖博士招生(3个名额)地质化工冶金领域 +51 AI8RaGaPaSCR 2026-08-07 54/2700 2026-08-14 03:15 by 51OlFEHbqXvR
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +11 医学老男孩 2026-08-13 29/1450 2026-08-14 00:04 by 大快人心啦
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 28/1400 2026-08-13 17:51 by 医学老男孩
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见