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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 急求高手帮忙解决 植株GFP发光在紫外灯下拍照问题 已有4人参与

我做了一个植物病毒表达载体(带eGFP),农杆菌侵染侵染植株后,在共聚焦下能观察到GFP发光,但是用长波紫外灯(365nm)照射植株苗的时候看不到发光。我现在就想得到像别人文献报道的那种图片效果。就大家帮忙分析下原因,急求大家给点建议。要是有人做过植物转基因后或农杆菌侵染瞬时表达GFP发光,在紫外灯下拍照的就最好了。我现在主要怀疑有两方面问题:一、是否我构的GFP不适合整个植株在紫外灯下观察?二、是不本实验室的紫外灯拍照效果不行或都拍照的时候需要其它特殊处理(如加滤光片等)。真诚希望大家的帮助,若有谁能帮咱解决问题。BB要多少给多少!!!

急求高手帮忙解决  植株GFP发光在紫外灯下拍照问题
别人文献中GFP发光图片.png
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 沉默的独角兽 at 2015-09-12 09:13:47
你的东西和文献上的不一样,你的只是瞬时表达吧,如果想要更强的可加一个沉默抑制子,文献上的是cDNA clone,看看时间14d,是病毒。所以答案我认为是第一个不适合。

其实我搞的跟文献上一样的都是病毒。经我后续实验发现,主要跟实验材料有重大关系,不同的植株上发光差别较大。在烟草的效果最好。
7楼2015-09-13 00:04:56
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tuodecai: 金币+2, 有帮助, 谢谢您的积极回复! 2015-01-11 19:56:11
应该是第二种可能,有可能是紫外灯的好坏,便宜的找不出那个图片
2楼2015-01-11 19:40:19
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 红卫大兵 at 2015-01-11 19:40:19
应该是第二种可能,有可能是紫外灯的好坏,便宜的找不出那个图片

实验室用的紫外灯参考文献中引用的   还从美国买回来的   一个破灯   花了好几千了   算是不便宜了   可就是不知道功能好不好了。   你有拍过像这样GFP发光的吗
3楼2015-01-11 19:56:10
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红卫大兵

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tuodecai at 2015-01-11 19:56:10
实验室用的紫外灯参考文献中引用的   还从美国买回来的   一个破灯   花了好几千了   算是不便宜了   可就是不知道功能好不好了。   你有拍过像这样GFP发光的吗...

我们只是看一下表不表达,用的是那种一万多一个的照灯,你照的时候可以先冲15分钟后在照
4楼2015-01-12 13:16:58
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