24小时热门版块排行榜    

查看: 5363  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

[求助] 关于羧基聚苯乙烯微球偶联抗体后的稳定性问题 已有1人参与

0.2um的羧基聚苯乙烯微球,通过EDC活化后偶联一个抗体,微球抗体复合物4度保存稳定性差。主要是4度保存后荧光信号会明显高于刚稀释好的微球的荧光信号,分析原因是聚苯乙烯微球的疏水作用,静电作用等可能导致微球包被抗体后发生部分凝集(肉眼不可见的凝集),通过优化标记抗体的浓度,缓冲液pH,EDC用量等均未能改变微球抗体复合物4度保存荧光信号升高的问题,望各位虫友给点好建议啊!如何稳定保存!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

小木虫

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

非荧光染料染色的彩球,是我们的常规产品,目前应用广泛,比如流体力学。在诊断上,主要是彩色层析和免疫凝集反应。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2015-09-17 17:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
王雨云: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2015-02-02 12:59:55
200nm荧光,你是做免疫层析吗?造成不稳定的原因复杂,但都能归结为微球表面电荷被平衡掉了。两微球靠彼此之间的电荷斥力分开,使整个体系维持溶胶状态。从EDC的加入开始,这种电荷平衡就被打破,后面加入抗体、封闭剂的时候,如果不能回复电荷平衡,体系就是不稳定的。所以,不妨试试:(1)选择表面电荷更多的微球,EDC只活化部分羧基,剩下部分来提供负电荷;(2)选择带同种电荷的blocker。(3)还得找个有经验的人手把手教你,细节很重要,呵呵。
欢迎交流huxuhua2008@163.com

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
2楼2015-02-02 08:00:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by youjihuaxue2000 at 2015-02-02 08:00:03
200nm荧光,你是做免疫层析吗?造成不稳定的原因复杂,但都能归结为微球表面电荷被平衡掉了。两微球靠彼此之间的电荷斥力分开,使整个体系维持溶胶状态。从EDC的加入开始,这种电荷平衡就被打破,后面加入抗体、封闭 ...

是做免疫层析的,标记pH做过6.0-9.0,用BSA作为封闭蛋白,理论上已经算选择的带同种电荷的blocker了吧。但还是没有改善2-8度保存荧光信号增强的问题。
3楼2015-02-02 13:21:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youjihuaxue2000

银虫 (小有名气)

pH太高。你可查一下EDC和NHS的水解pH,你把pH调这么高,我怀疑几乎没有共价交联。5.4是最佳的,但不适合。一般用6~6.5。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2015-02-03 07:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+5) +9 晴天加油 2026-08-26 10/500 2026-08-27 16:20 by 443933501
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 青基如何破局 +3 lyz123lyz 2026-08-27 4/200 2026-08-27 13:08 by kulium
[基金申请] 基金不中,共勉 +8 eulota 2026-08-26 8/400 2026-08-27 12:34 by lice_1987
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 17/850 2026-08-27 08:20 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
信息提示
请填处理意见