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关于羧基聚苯乙烯微球偶联抗体后的稳定性问题 已有1人参与
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| 0.2um的羧基聚苯乙烯微球，通过EDC活化后偶联一个抗体，微球抗体复合物4度保存稳定性差。主要是4度保存后荧光信号会明显高于刚稀释好的微球的荧光信号，分析原因是聚苯乙烯微球的疏水作用，静电作用等可能导致微球包被抗体后发生部分凝集（肉眼不可见的凝集），通过优化标记抗体的浓度，缓冲液pH，EDC用量等均未能改变微球抗体复合物4度保存荧光信号升高的问题，望各位虫友给点好建议啊！如何稳定保存！ |
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13楼2017-02-27 10:18:17
youjihuaxue2000
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【答案】应助回帖
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王雨云: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2015-02-02 12:59:55
王雨云: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2015-02-02 12:59:55
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200nm荧光，你是做免疫层析吗？造成不稳定的原因复杂，但都能归结为微球表面电荷被平衡掉了。两微球靠彼此之间的电荷斥力分开，使整个体系维持溶胶状态。从EDC的加入开始，这种电荷平衡就被打破，后面加入抗体、封闭剂的时候，如果不能回复电荷平衡，体系就是不稳定的。所以，不妨试试：（1）选择表面电荷更多的微球，EDC只活化部分羧基，剩下部分来提供负电荷；（2）选择带同种电荷的blocker。（3）还得找个有经验的人手把手教你，细节很重要，呵呵。 欢迎交流huxuhua2008@163.com [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
2楼2015-02-02 08:00:03
3楼2015-02-02 13:21:12
youjihuaxue2000
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4楼2015-02-03 07:44:46