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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » Taq 酶扩增的片段能连接平末端载体吗
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颖颖贝

铜虫 (小有名气)

[求助] Taq 酶扩增的片段能连接平末端载体吗已有3人参与

Taq 酶扩增的片段能连接平末端载体吗？
师姐说Taq酶扩增后在3‘端会加一个A，这样就不能连在平末端的T载体上了。
那这样的话，我扩增到的片段就只能直接连在一般的T载体上了吧。
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1楼2015-01-08 11:31:47
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18761615793

木虫 (正式写手)

小虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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颖颖贝: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-01-09 18:00:07
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:28:42
呵呵 ，是的，普通Taq酶扩增的结果会默认的带有一个A碱基。在购买酶的时候，你可以先了解清楚在买。因为也有很多酶扩增出来是没有A碱基的，所以关键还是用酶。高保真酶好像没有必要使用的，普通Taq酶（当然是不产生A碱基的）或者是热启动酶就可以了。
希望对你有所帮助
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todayisdifficult，tomorrowismoredifficult，butthedayaftertomorrowisbeautiful
3楼2015-01-09 11:50:53
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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颖颖贝: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-01-09 17:59:56
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:28:34
你师姐说的对，Taq酶扩增的连T载，Pfu、Pfx、Pwo、Vent、Phusion、KOD等高保真酶扩的可以连平末端载体。
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2楼2015-01-08 21:17:35
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jonew

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2015-01-09 19:28:49
卡死的只能连一般的载体   保真酶才用平末端载体
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借口很贱，，，
4楼2015-01-09 11:59:33
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