24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3450  |  回复: 23
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

berry94

铁虫 (初入文坛)

[求助] 高GC含量目的基因的克隆 已有14人参与

大家好,我要克隆一个1.2K的目的基因,GC含量70%,克隆了很长时间了,一直没有什么进展,特地来向前辈们求助。个人认为RNA提取应该是很好的,一直觉着反转录得不好,我用的promega A5000的反转录试剂盒,48度、50度反转过,都没有扩出条带,做RACE也没有得到结果,所以希望有经验者提下意见,让晚辈进步!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

实验快快出结果
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

berry94

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by lanhongxia at 2015-01-06 13:00:11
有专门用于高GC含量的酶,可以承受较高温度的变性,延伸温度而不失活,楼主可以试一下。

谢谢,我用另的primestar ,应该可以不?请问你觉得我的反转录42度对于高GC会不会有问题?
实验快快出结果
9楼2015-01-06 15:10:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 24 个回答

稻稻

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用的什么酶?个人认为酶是关键

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
2楼2015-01-04 20:40:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小刀188

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:44:24
加点GC—buffer再做一下,GC含量高很难克隆的
3楼2015-01-05 09:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

berry94

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 稻稻 at 2015-01-04 20:40:19
用的什么酶?个人认为酶是关键

宝生物的primestar酶,我觉得我反转的效果可能不好,大侠觉得promega的A5000 48度能反转出我的cDNA吗
实验快快出结果
4楼2015-01-05 16:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +29 招61排名62 2026-04-07 33/1650 2026-04-13 10:16 by sxdj2
[考研] 考研英一数一338分 +6 长江大学东校区 2026-04-13 7/350 2026-04-13 09:40 by fqwang
[考研] 271求调剂 +23 2261744733 2026-04-11 23/1150 2026-04-13 08:48 by 学zh
[考研] 346分,工科0854求调剂,专硕 +6 moser233 2026-04-12 7/350 2026-04-12 22:11 by fqwang
[教师之家] 山东双非院校考核超级无底线,领导幸灾乐祸,教师遭殃恐 +3 qut2026 2026-04-11 7/350 2026-04-12 20:24 by qut2026
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 308求调剂 +5 VvvvL 2026-04-10 5/250 2026-04-12 10:17 by babysonlkd
[考研] 化学工程调剂289 +44 yang婷 2026-04-07 50/2500 2026-04-12 02:36 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂 +18 MAX怅惘 2026-04-09 20/1000 2026-04-11 23:31 by zhen~
[教师之家] 请问地理、遥感方面,可以做哪些横向项目啊,纵向完不成考核啊 +3 锦衣卫寒战 2026-04-07 5/250 2026-04-11 20:51 by 豫椒
[考研] 296求调剂 +6 汪!?! 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +16 叶zilin 2026-04-10 16/800 2026-04-11 11:04 by may_新宇
[考研] 083200 305分 求二轮调剂 不接受跨专业 +9 Claireyyyy 2026-04-09 10/500 2026-04-10 21:21 by Claireyyyy
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +7 上岸de小虫 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:56 by fxue1114
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 8/400 2026-04-10 19:13 by chemisry
[考研] 材料工程调剂 +12 小刘同学吖吖 2026-04-06 13/650 2026-04-09 17:07 by luoyongfeng
[考研] 286求调剂 +19 Faune 2026-04-08 20/1000 2026-04-09 08:36 by 哦哦123
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 一志愿吉大化学327求调剂 +12 王王白石 2026-04-06 13/650 2026-04-08 16:05 by luoyongfeng
[考研] 材料调剂 +13 汉123456 2026-04-07 14/700 2026-04-07 22:53 by 来看流星雨10
信息提示
请填处理意见