| 查看: 3277 | 回复: 16 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
不同PH值流动相的配制 已有1人参与
|
||
|
各位，在此想请问一个关于不同PH值的磷酸盐缓冲液的配制问题，以前做液质较多，通常都采用不同浓度的有机酸，现在做药物分析，发现很多液相的分析方法都是采用磷酸盐的缓冲液做流动相，并且好多还是等度分析的，经验丰富的同行希望赐教几个问题： 1.为什么液相分离常采用磷酸盐缓冲液？采用不同浓度的甲酸或TFA可以吗？是不是这样每次配制的PH会不准确，导致RT或分离度有变化，如果我能确保每次都一致，能否使用？ 2. 有时是等度分离？但我的有关物质较多，等度不能分开，必须要采用梯度，这样基线就会不平，看着不好看，并且杂质积分不准确，有解决的办法吗？ 3. 最搞不明白的就是，配制不同PH值的磷酸盐缓冲液怎么配制？比如我想配制PH为2.0、2.5、3.0的流动相，我根据药典的缓冲液配制方式配制后使用，感觉离子浓度较大，有机相泵老出问题，一会没压力，一会压力高，一会压力又不稳，很奇怪，A泵用的磷酸盐，可B泵老出问题，搞不懂。然后看别的文章好多都是用多少mmol的磷酸盐，然后用磷酸调PH值至所需要的，现在问题就是，这个磷酸盐通常用什么呢？有磷酸二氢钠，磷酸二氢钾、磷酸二氢铵？用哪种有什么差异吗？可能还有我不知道的别的盐。 4. 那么配制这个缓冲盐到底是用药典的缓冲液配制方式还是随意配制盐的浓度，然后用磷酸调呢？ 希望在此行业熟悉的朋友能赐教，谢谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
国社科又开始会评了，不知道这次命运如何
已经有11人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有19人回复
-
基金未中，这种答复是模板吗？
已经有7人回复
-
哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识
已经有7人回复
-
面上意见出来了
已经有23人回复
-
能否申诉？
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pka为5.69的药物，做成注射液ph值怎么选择范围
已经有9人回复
- PH=10的乙酸铵溶液应该怎样配呢
已经有5人回复
- 制备液相流动相的pH调节问题
已经有16人回复
- 溶液配制的问题：溶液中的某种组分指定了pH值，该如何配置？
已经有11人回复
- 液相色谱 流动相的问题
已经有11人回复
- 磷酸二氢钾溶液ph问题
已经有5人回复
- 用乳酸配置不同PH值的溶液
已经有4人回复
- 不同PH值的PBS及铁氰化钾溶液的配制
已经有5人回复
- 流动相配置问题
已经有22人回复
- 流动相为啥要用磷酸盐缓冲液？
已经有16人回复
- 溶液稀释后调PH=5.5与 直接配制溶液调PH=5.5 有区别吗？求助专业有经验人士
已经有10人回复
- HPLC中流动相的pH问题？
已经有41人回复
- 请问怎么根据化合物的pKa值来选择流动相的PH值
已经有8人回复
- 外标法标准曲线的斜率和截距值有何要求
已经有6人回复
- 20mmol/L PH=4.5的磷酸缓冲盐流动相的配制
已经有5人回复
- 【求助】关于流动相调PH，紧急，谢谢大家。
已经有16人回复
- 【求助】虫友们有用过氨基柱的吗？了解的请帮忙看一下。
已经有9人回复
- 【求助】乙二胺调节pH值时，流动相的颜色变了，这是为什么？？？
已经有3人回复
- 【求助】求配制不同PH值的PBS溶液！急！
已经有9人回复
- 【求助】调节PH值的问题
已经有12人回复
5楼2015-01-04 14:48:14
archbishop
禁虫 (职业作家)
- ACI: 2
- 应助: 190 (高中生)
- 贵宾: 3.213
- 金币: 13682.5
- 散金: 5394
- 红花: 150
- 沙发: 5
- 帖子: 4552
- 在线: 1148.3小时
- 虫号: 792812
- 注册: 2009-06-12
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
- 管辖: 分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xcbjl1234: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-01-04 15:35:57
感谢参与，应助指数 +1
xcbjl1234: 金币+20, ★★★很有帮助 2015-01-04 15:35:57
|
1. 单独添加甲酸或者TFA没有缓冲效果。 2. 肯定要用梯度，等度分不开根本无法得到令人信服的结果。基线不平是正常情况，不会影响积分。 3. 因为A和B在混合的时候磷酸盐会析出，不要配的浓度太高。用哪种盐都行，pH高了调低低了调高，最后达到所需要的pH就行了。 4. 怎么配都行，但是每次都得保持一致。 另外，梯度洗脱的时候有机相比例不能太高，否则盐会析出。 |
2楼2015-01-04 13:44:52
3楼2015-01-04 14:20:17
archbishop
禁虫 (职业作家)
- ACI: 2
- 应助: 190 (高中生)
- 贵宾: 3.213
- 金币: 13682.5
- 散金: 5394
- 红花: 150
- 沙发: 5
- 帖子: 4552
- 在线: 1148.3小时
- 虫号: 792812
- 注册: 2009-06-12
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
- 管辖: 分析
4楼2015-01-04 14:30:04
