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求助!!!PCR灵敏性实验~!!
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| 本人是做PCR的新手,现在正在做灵敏性实验,模板梯度稀释老是稀释不好,跑出的条带要么明暗度不好,要么高浓度没有条带低浓度铀条带。。。纠结的不行。。。特来请教各位虫友,有没有高手指点下,模板稀释过程中要注意一那些细节哇~!!!!! |
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13楼2015-01-29 15:46:22
红卫大兵
木虫 (正式写手)
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6楼2015-01-04 13:13:16
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:49:18
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回贴交流 2015-01-07 22:49:18
| 楼主的模板是什么啊,如果是质粒的话,你的梯度稀释时还可以看到一个比较好的亮度梯度的,如果是gDNA的话,很多时候是稀释度越高,PCR的效率越高,导致跑调带的时候也越亮,当然这个趋势不是无限制的,但在一定浓度内是这个样子。建议楼主如果只是验证PCR体系灵敏度,与模板类型无关的话,还是换成质粒,效果好点。不过我是不太明白,现在灵敏度还是跑胶后用软件ImageJ测光度吗,那个人为影响太大了,如果有荧光PCR的话就准确多了,当然这只是我想的啊,希望能够帮到你 |
7楼2015-01-05 10:04:35
puresnowlqin
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8楼2015-01-05 15:34:00













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