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小朱大宝

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光定量PCR 已有2人参与

我们平时一般做荧光定量PCR都是以RNA为起始材料,将其反转录成cDNA之后进行PCR操作,但是在一篇关于端粒长度测定的文献中,实验是以基因组DNA为起始材料,直接进行PCR操作。我想请问什么时候可以直接以基因组DNA进行荧光定量,而不需要提RNA,然后反转录成cDNA再进行荧光定量。
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cckk_2000

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-12-29 19:25:47
小朱大宝: 金币+2, 有帮助 2014-12-30 09:50:26
我们平时做的定量PCR,目的是为了验证在干预前后“可表达”基因的表达量的变化,当然取材是mRNA,需要反转录之后才能做PCR。但是你刚才提到的是端粒长度,端粒中的DNA是不表达的,只要引物设计合理,完全可以直接用基因组DNA为原料进行PCR。总之,不是荧光定量PCR一定要用cDNA,而是取决于你实验的目的。
科研炮灰
2楼2014-12-29 13:50:52
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chengxiaohua

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-29 13:50:52
我们平时做的定量PCR,目的是为了验证在干预前后“可表达”基因的表达量的变化,当然取材是mRNA,需要反转录之后才能做PCR。但是你刚才提到的是端粒长度,端粒中的DNA是不表达的,只要引物设计合理,完全可以直接用 ...

您好!我想问问您是否知道哪些公司或者哪些团队能测植物端粒长度?请您尽快给予回复,万分感谢!

发自小木虫Android客户端
3楼2017-03-19 23:31:11
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chengxiaohua

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cckk_2000 at 2014-12-29 13:50:52
我们平时做的定量PCR,目的是为了验证在干预前后“可表达”基因的表达量的变化,当然取材是mRNA,需要反转录之后才能做PCR。但是你刚才提到的是端粒长度,端粒中的DNA是不表达的,只要引物设计合理,完全可以直接用 ...

您好!请问您能测植物端粒长度吗?或者您认识能测端粒长度的公司或团队吗?急求!请您尽快回复,万分感谢!

发自小木虫Android客户端
4楼2017-03-19 23:33:53
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