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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 东西第二次就P不出来了同样的
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-12-12 19:36:15
如果你真的确定东西都一样，且没有加错，少加，那可能是PCR仪的孔有问题了

嗯，确定没加错，你说的这个问题出现的几率大吗？实验室经常PCR呀，感觉仪器正常。
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11楼2014-12-12 20:06:59
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随风飘摇11

木虫 (著名写手)
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11楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-12-12 20:06:59
嗯，确定没加错，你说的这个问题出现的几率大吗？实验室经常PCR呀，感觉仪器正常。...

概率很小。 那你就扩个整板看看，或许还真能有某些孔不能用的

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天道酬勤
12楼2014-12-12 20:41:55
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
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12楼: Originally posted by 随风飘摇11 at 2014-12-12 20:41:55
概率很小。 那你就扩个整板看看，或许还真能有某些孔不能用的
...

好吧，我拿去给别的实验室了，看看能不能P出来吧
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13楼2014-12-12 20:58:15
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再闹不给糖

新虫 (正式写手)
★
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我也遇到过，之前跑出来一次，然后后来跑了三次都没跑出来···条件体系都一样
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天空没有留下翅膀的痕迹，我却从中飞过
14楼2014-12-12 22:33:29
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kehope

金虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-12-12 11:03:37
是吗？就是做PCR，第一次P出来了，再P就P不出来，什么都没换过，很难理解吗/...

显然前后是有不一样。说你说的笼统，是你提供太少内容，怎么给你分析问题出在哪里？
你的模板是什么来的？质粒？cdna？植物来源的？细菌来源的？浓度？
pcr引物是啥？长度多长？片段重合多少。引物评分怎么样？tm是多少？
你的反应体系是什么？上样顺序？最后有离心跟混匀？
。。。。。。

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15楼2014-12-13 01:37:44
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xuanergege

新虫 (初入文坛)
★
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有可能第一次是假阳性
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16楼2014-12-13 18:43:55
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
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16楼: Originally posted by xuanergege at 2014-12-13 18:43:55
有可能第一次是假阳性

额，可能性不大
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17楼2014-12-15 14:34:33
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
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14楼: Originally posted by 再闹不给糖 at 2014-12-12 22:33:29
我也遇到过，之前跑出来一次，然后后来跑了三次都没跑出来···条件体系都一样

我让别的实验室帮我做了，结果P出来了。
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18楼2014-12-15 14:35:29
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再闹不给糖

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
18楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-12-15 14:35:29
我让别的实验室帮我做了，结果P出来了。...

看来我也得试试，让别人帮忙做做了
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天空没有留下翅膀的痕迹，我却从中飞过
19楼2014-12-15 21:06:09
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by 再闹不给糖 at 2014-12-15 21:06:09
看来我也得试试，让别人帮忙做做了...

我后来又把所有东西都换了一遍，结果也P出来了，但是用同学那个体系，P出来的条带更亮。
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20楼2014-12-17 11:15:40
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