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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 丁香园没人理，请小木虫的专家帮忙：关于DNA变异后cDNA测序
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xiaosuan2013

新虫 (初入文坛)

[求助] 丁香园没人理，请小木虫的专家帮忙：关于DNA变异后cDNA测序 已有1人参与

我有四个样本，一个是病人，有杂合突变，两个杂合突变的携带者，及一个正常人。以上结果是经DNA一代测序所得，这个杂合突变是该病的一个确定的致病基因，很多文献报道了，主要是引起蛋白质功能改变。可是当我提取RNA，反转录cDNA后进行测序，却得不到杂合突变，全是正常表型。谁来告诉我这是怎么回事，无论DNA还是cDNA实验都是做过两遍以上，还是请生工和invitrogen做的。是哪里出问题了？
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1楼 2014-12-09 21:54:50
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xiaosuan2013

新虫 (初入文坛)
临床医生要管病人，要值夜班，搞科研也是痛苦啊。
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2楼2014-12-09 22:00:04
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
检查一下测序结果是不是套峰，突变位点大峰底下有没有套一个矮一点的峰
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-10 03:50:25
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xiaosuan2013

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-12-10 03:50:25
检查一下测序结果是不是套峰，突变位点大峰底下有没有套一个矮一点的峰

查过了，没有的。尤其和DNA测序比对，DNA时两个峰很明显，但cDNA就没有，是不是直接做ENA测序会准确？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-12-10 08:54:41
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xiaosuan2013

新虫 (初入文坛)
RNA测序

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-12-10 08:56:15
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