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LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)

[求助] 乳鼠肾细胞的原代培养，出现了空泡、亮点等问题，请问是什么原因？ 已有1人参与

第一次做乳鼠肾细胞的原代培养，用的是DMEM培养基，加血清加双抗。传代后出现了一些现象，请大虾们帮忙看看是什么原因？

1、部分细胞内出现了空泡的现象，且这些细胞贴壁状态不好。查过资料后有人说是缺营养，也有人说是支原体污染，但培养基的pH偏酸，好像不像是污染。
2、培养基和细胞内都有小亮点，并且这些亮点多是一对一对出现，是细胞的分泌物还是外来污染？
3、细胞出现多核现象。在培养Hela等癌细胞时经常能看到多核现象，但不知像肾细胞这种组织细胞中出现多核现象正常吗？除了细胞分裂和两细胞融合的原因，还有什么可能能造成多核现象发生的原因？
4、细胞核中深色点增多，是多核仁吗？出现这种现象是指示细胞代谢旺盛，还是状态不好？

照片都在附件里，问题有点多，还望有经验的筒子们可以帮忙分析一下……> <

乳鼠肾细胞的原代培养，出现了空泡、亮点等问题，请问是什么原因？
多核/核仁.JPG


乳鼠肾细胞的原代培养，出现了空泡、亮点等问题，请问是什么原因？-1
空泡.JPG


乳鼠肾细胞的原代培养，出现了空泡、亮点等问题，请问是什么原因？-2
亮点.JPG
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1楼 2014-12-09 20:46:03
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by LisaT_PUMC at 2014-12-11 00:01:03
十分感谢！！

支原体污染是说那些亮点还是空泡？这盘原代细胞确实污染很多，但我今天刚做了293T的转染，之后也出现了那些亮点，如果是亮点的话应该不是污染吧…...

细胞都 空泡化了，这是支原体污染比较严重的时候出现的状态

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4楼2014-12-11 12:16:43
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小苹果168

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是支原体污染啊，兄弟，加双抗对原代细胞生长很不利的
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2楼2014-12-10 09:45:35
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LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-12-10 09:45:35
是支原体污染啊，兄弟，加双抗对原代细胞生长很不利的

十分感谢！！

支原体污染是说那些亮点还是空泡？这盘原代细胞确实污染很多，但我今天刚做了293T的转染，之后也出现了那些亮点，如果是亮点的话应该不是污染吧…
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3楼2014-12-11 00:01:03
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LisaT_PUMC

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-12-11 12:16:43
细胞都 空泡化了，这是支原体污染比较严重的时候出现的状态
...

谢谢~
另外请问你有遇到过那种亮点吗？同实验室师兄说转染后出现亮点不是很严重的问题，所以亮点应该仅仅指示细胞状态的问题吗？
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5楼2014-12-11 15:47:41
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