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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 怪异的扩增曲线
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云飏

金虫 (初入文坛)

[求助] 怪异的扩增曲线

如题 图在文件中
刚开始做qPCR，出现了这个扩增曲线，请高人指点！！！
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  • 附件 1 : 扩增曲线图.doc
    • 2014-12-08 23:21:36, 40.5 K

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1楼 2014-12-08 23:22:48
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bbqlhb

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云飏 at 2014-12-09 09:20:45
再请问，图比一般的要“歪”，该怎么解释，或者该怎么改进？...

查了一下，那个好像是叫阈值线。。。好吧，我只会做
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5楼2014-12-09 10:50:09
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
云飏: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-12-09 09:17:11
有什么问题？只是基线设置太高而已
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2楼2014-12-09 08:58:53
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云飏

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bbqlhb at 2014-12-09 08:58:53
有什么问题？只是基线设置太高而已

再请问，图比一般的要“歪”，该怎么解释，或者该怎么改进？
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3楼2014-12-09 09:20:45
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bbqlhb

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
云飏: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-09 15:45:01
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云飏 at 2014-12-09 09:20:45
再请问，图比一般的要“歪”，该怎么解释，或者该怎么改进？...

看吧，首先，基线不是那个CT值的线。
基线设定在每台不同的实时PCR仪都有，设定好后，系统会选择基线下区域（前面比较平缓的没有开始扩增的区域）作为荧光的初始值。
可以看到，下面那个图，因为前面有个比较高的点，而基线设置不好，把整个曲线都整体掰弯了。
这样说，你能明白没？
怪异的扩增曲线
1.jpg
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4楼2014-12-09 10:41:29
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