| 查看: 2769 | 回复: 15 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
HSY郡主新虫 (初入文坛)
|
[求助]
目的基因和表达载体连接不上，求指导！！！ 已有3人参与
|
|
|
我的目的基因2.2k，送去公司直接合成的。合成后的目的基因连接在puc57载体上，质粒大小为4.9k，其中目的基因2.2k，puc57载体本身2.7k。以质粒为模板进行pcr，胶回收目的片段，然后双酶切（bamh1和ecor1）目的片段和表达载体pyes2（5.9k），连接，转化。平板顺利长菌了，菌落pcr结果为阳性，提质粒酶切以后，却惊奇的发现两条带的大小约为2.2k和2.7k！！！！质粒竟然是最初的“目的基因+puc57载体”，而不是自己想要的“目的基因+pyes2载体”！！！全是假阳性，没有我想要构建的质粒，why？！！！ 我明明已经切胶回收了，按说不应该污染这么多当时pcr做模板的质粒啊，新手上路，求大家指导！ |
回复此楼» 猜你喜欢
2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？
已经有19人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
今天务委会开完了，明天出结果吗
已经有21人回复
-
在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。
已经有9人回复
-
明天应该可查了！？
已经有6人回复
-
有没有大神帮我看看基金代码
已经有10人回复
-
放榜前的不淡定
已经有19人回复
-
某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感
已经有10人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有23人回复
-
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有22人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于目的基因与载体连接后转化感受态细胞提取质粒的问题。
已经有8人回复
- 目的片段与表达载体怎么都连接不上
已经有16人回复
- 求帮助！基因连接克隆载体后转化大肠杆菌，两天了都没长出菌。。。
已经有10人回复
- 目的基因的表达
已经有10人回复
- 目的片段和载体连接一直不上
已经有24人回复
- exceed10安装不上，求大神指导！！
已经有5人回复
- 目的基因与载体连接问题
已经有8人回复
- 什么方法确定插入目的片段后表达载体的阅读框有无发生变化？
已经有9人回复
- 克隆基因为什么一直连不到载体上
已经有11人回复
- 关于目的基因不同向连接到T载体上的问题
已经有19人回复
- 为什么扩了一个抗性基因，连到载体上，这个基因没有表达呢，跪求各个大牛指导！！！
已经有17人回复
- 目的基因连接表达载体的质粒PCR验证，结果出现2条带
已经有10人回复
- 目的基因表达载体的构建问题~请指教
已经有6人回复
- 表达载体的链接
已经有16人回复
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 目的片段与表达载体的连接
已经有23人回复
- 【求助/交流】目的基因与pPIC9K连接的问题！
已经有9人回复
- 【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办
已经有17人回复
- 【求助/交流】目的片段与载体连接不上
已经有16人回复
- 【求助/交流】目的基因连接表达载体后涂板不长菌
已经有11人回复
- 【求助/交流】连接表达载体PET-28A失败原因
已经有23人回复
HSY郡主
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 51.5
- 帖子: 23
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 2454311
- 注册: 2013-05-08
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
5楼2014-12-08 19:02:09
2楼2014-12-08 14:48:56
HSY郡主
新虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 51.5
- 帖子: 23
- 在线: 10.4小时
- 虫号: 2454311
- 注册: 2013-05-08
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2014-12-08 15:31:46
4楼2014-12-08 17:23:54
