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梦想飞扬1金虫 (正式写手)
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从土壤-藻结皮中分离藻 已有1人参与
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要测定和土壤粘连在一块的藻的植物效率PEA，可很难分离出藻，藻的密度比水稍大一点，用差速离心藻也沉在下面了。这里说的藻类似于地衣，苔藓。求大神们给点建议。 [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] |
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zff922
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3楼2014-12-06 01:06:45
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【答案】应助回帖
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如果是测色素和蛋白质，我认为即使藻和土壤不完全分离也应该可以的呀。测色素用甲醇萃取出来离心测上清OD就行了，蛋白直接用试剂盒土壤应该不会有太大干扰的。 另外，藻细胞不会像你说的那么脆弱，搅拌一下就破了，我们离心上万G都不会破，地衣破了也只是组织破成了单个细胞。单个细胞必须要用液氮反复冻融，或者超声波破碎或者玻璃微珠高速打碎才能达到所要的效果。搅拌应该不会破，你不放心的话，可以搅拌一些，然后5000g离心，看看上清变绿了没？绿了就证明有破碎，还是无色透明证明没有破碎。 蔗糖我们都是用来做密度梯度离心用的，那是细胞破过之后，对于测色素和蛋白质我也没做过，不知道会不会有影响。太高浓度会引起细胞的是水，对活性肯定有影响的。你可以先用蔗糖，分离好后再换成BG11.这样我认为可能会影响小一些。 |
4楼2014-12-08 09:29:37