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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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侠客王子梦

木虫 (小有名气)

[求助] 提取的RNA电泳图,都快崩溃了…… 已有5人参与

新手第一次提取RNA,已经试了好多次,但结果都不怎么样!感觉每一步的操作都是按照要求进行的,电泳是1×TAE缓冲液,微型电泳槽90V跑了13min……真心想知道还有哪些细节需要特别注意的!

提取的RNA电泳图,都快崩溃了……
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提取的RNA电泳图,都快崩溃了……-1
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提取的RNA电泳图,都快崩溃了……-2
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nculst

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
侠客王子梦(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-07 19:49:45
楼主是按Trizol说明书做的吗?中间是不是每加一次试剂就放置十几分钟的?你直接不放置或冰块中放置3min左右直接去离心试试,我后来是这样成功的。还有楼主的问题很有可能是组织块大,Trizol试剂只浸没了组织外表面,组织中间的RNA酶照常会降解,推荐用液氮研磨后再加Trizol提取。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2014-12-07 10:01:59
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
降解了,你用什么方法提的,样品什么情况,细说来

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-01 21:50:06
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侠客王子梦

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-12-01 21:50:06
降解了,你用什么方法提的,样品什么情况,细说来

用trizon法,样品是大鼠的肝脏组织,样品一份是用样品保存液-20℃保存的,一份之前是在液氮中保存,前两天刚放进-80度冰箱!操作的时候我没有做液氮研磨这一步,直接加trizon匀浆的!
3楼2014-12-01 21:54:14
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稻稻

铜虫 (著名写手)


侠客王子梦(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-07 19:50:01
是降解了。新手建议你刚开始一次少提几个样。我是做植物的,这半年提的质量都不好,不过前天换了另一家公司的提取液,就好了。可以做个平行对照实验找一下原因。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
做一个不动声色的人,不准情绪化,不准回头看。
4楼2014-12-01 23:06:48
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