24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

handsomejjs

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 208
帖子: 21
在线: 201.1小时
虫号: 1401325
注册: 2011-09-14
专业: 其他无机非金属材料

[求助] 酶切质粒是否可以不跑胶，直接纯化？已有8人参与

提出的质粒经常酶切不彻底，跑胶出现线形和环形两条带。

我的问题是，直接纯化，环形质粒是否会被线形过滤柱洗脱? 如果环形能被柱子分离，是否就可以直接纯化，不用跑胶了？

非常感谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有282人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

质粒，PCR产物双酶切后胶回收不回来？求大神指导！已经有49人回复
9.0kb载体与2.4kb片段为什么用T4连接酶连接，没有得到阳性克隆？已经有7人回复
如何做分步双酶切已经有6人回复
目的基因连T载体能连上，双酶切后连不上HTB质粒，都三个月了，纠结啊。。。已经有21人回复
载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗？已经有12人回复
PCR产物不做纯化和胶回收，直接TA克隆可以吗？已经有13人回复
请问同样大小的不同质粒，跑出来的DNA胶为什么参差不齐呢？已经有11人回复
Xho1和EcoR1双酶切，切不开已经有14人回复
空质粒双酶切后大小不对，纠结！已经有11人回复
请教PCR产物酶切后是否可以直接过柱纯化而不胶回收？已经有15人回复
求助关于双酶切空载跑胶没有条带！已经有15人回复
测序正确的质粒用SfiI酶切不动，请问有什么相关文献吗已经有6人回复
质粒酶切切不动，质粒在宿主中繁衍酶切位点会突变么？已经有8人回复
质粒PCR大小正确，可是双酶切切不开已经有8人回复
酶切后未纯化连接出现的问题已经有18人回复
提取的质粒跑出四条或者五条带，但酶切后只有一条带，是不是我的质粒污染了已经有18人回复
将质粒上紧挨着的两个酶切位点进行双酶切后连接外源基因片段，是不是不好连接？已经有13人回复
有谁试过双酶切的同时加碱性磷酸酶已经有4人回复
我酶切质粒后，电泳显示没有切开，是不是因为酶在外面放的时间长了？已经有9人回复
【原创经验篇】由一个简单的酶切重组载体想到的.......... 已经有31人回复
双酶切没出现目的条带，呈弥散型，有图，求助。已经有7人回复
【求助/交流】质粒DNA可以不通过酶切直接跑电泳检测吗？已经有24人回复
【求助/交流】PCR产物直接纯化，不用胶回收和试剂盒，请问有这种方法吗？已经有6人回复
【求助/交流】环状质粒DNA跑胶速率是不是慢于线状DNA？已经有6人回复

1楼2014-11-30 05:01:52

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cckk_2000

金虫 (小有名气)

应助: 41 (小学生)
金币: 109.1
红花: 3
帖子: 83
在线: 26.8小时
虫号: 2527948
注册: 2013-07-01
性别: GG
专业: 细胞信号转导

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
handsomejjs(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-30 15:47:51
handsomejjs: 金币+1 2014-12-09 05:30:32
handsomejjs: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-09 05:30:40

纯化去除的是盐和酶之类的，DNA去除不了，跑胶就是为了分离未切和切开的，但是其实切不开有一个更好的解决办法，减少质粒的量，增加酶切时间。