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汕头大学海洋科学接受调剂
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handsomejjs

银虫 (初入文坛)

[求助] 酶切质粒是否可以不跑胶,直接纯化? 已有8人参与

提出的质粒经常酶切不彻底,跑胶出现线形和环形两条带。

我的问题是,直接纯化,环形质粒是否会被线形过滤柱洗脱? 如果环形能被柱子分离,是否就可以直接纯化,不用跑胶了?

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zhaodahe

木虫 (正式写手)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-30 15:47:27
handsomejjs: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-09 05:30:05
酶切质粒必须切胶回收,否则后面都是空质粒。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-11-30 07:16:34
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喜气洋洋

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-30 15:47:18
我这两天也在纠结这个问题中,以前做三个酶同时切都没出现跑胶拖尾的,这两天单酶切质粒跑胶几次都是酶切不完全或拖尾严重,好郁闷呀。今天又得重做了,朋友知道好建议了也和我分享一下哦

[ 发自小木虫客户端 ]
学海无涯懂做舟
2楼2014-11-30 07:00:06
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xzy0425

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-30 15:47:35
handsomejjs: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-09 05:30:14
如果是单酶切,适当延长酶切时间,带充分酶切后,可以直接进行过柱回收;非单酶切,如果酶切位点很近也可以,否则不可以,只能进行切胶回收。
4楼2014-11-30 10:46:15
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-11-30 15:47:43
handsomejjs: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-12-09 05:30:21
少切点质粒就行了,然后直接过柱回收

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-11-30 10:59:22
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