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1楼2014-11-24 20:59:14

已阅关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dulei

木虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 8 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
luchao507: 金币+3 2014-11-25 21:19:50

PCR对于退火温度的依赖性特别小，只要不是过高的Tm值，上下范围差个10度都能P出了，所以梯度PCR对于目标条带影响不大（会有“亮暗”的小区别，不会引起目标条带“有无”的区别）。

你这种情况，模板可能加的过多了，你把模板稀释10-30倍后，再做PCR。同时循环数，加到35-40。
试试。

或者，你既然已经P出来一管，那么就用P出来的PCR产物，作为模板，再进行PCR（也就是二次PCR），肯定有目标产物。