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luchao507

禁虫 (小有名气)

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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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luchao507: 金币+3 2014-11-25 21:19:50
PCR对于退火温度的依赖性特别小,只要不是过高的Tm值,上下范围差个10度都能P出了,所以梯度PCR对于目标条带影响不大(会有“亮暗”的小区别,不会引起目标条带“有无”的区别)。

你这种情况,模板可能加的过多了,你把模板稀释10-30倍后,再做PCR。同时循环数,加到35-40。
试试。

或者,你既然已经P出来一管,那么就用P出来的PCR产物,作为模板,再进行PCR(也就是二次PCR),肯定有目标产物。
9楼2014-11-25 20:05:40
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航帆

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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luchao507: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-24 21:20:38
有时候实验是个人品积累的过程……等人品攒够了,或许就出来了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-11-24 21:19:13
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fuchange918

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
luchao507(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-25 13:13:24
换酶试一下,我有一次摸索温度用rTaq酶出了目的条带,在重复就出不来了,换Etaq也没出来,换LA就出了
3楼2014-11-25 07:55:43
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ixiaoye2012

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
luchao507(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-25 13:13:35
Tm42,这种结果也能信?给你个建议做一下降落PCR
就算大雨将整座城市颠倒,我也会给你拥抱
4楼2014-11-25 11:37:09
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