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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 抗体可以用于WB,但不能用于免疫荧光
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

[求助] 抗体可以用于WB,但不能用于免疫荧光 已有5人参与

我有个抗体用Western Blot跑的效果非常好，但是一用于免疫荧光就出现诡异现象
免疫荧光的结果和其他人文献报道以及我之前实验结果完全矛盾，总之就是蛋白聚集在了本来不应该聚集的地方
我老板看到结果很兴奋 觉得是重大发现，她不相信我，坚持不可能是实验错误。 又非常抠门，不愿意再买一管其他的抗体试下
免疫荧光用的二抗也肯定没问题，因为以前用这个二抗做过别的蛋白的免疫荧光
有什么理论支持能帮我说明用于WB的抗体不一定能用于细胞免疫荧光啊
我看那个公司的网站上卖两种这个蛋白的抗体，一种抗体写明了可以用于免疫荧光，另一种没有标上可用于免疫荧光，所以怀疑是抗体有问题
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
1楼 2014-11-20 01:27:34
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西昆仑

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

很多抗体公司的产品都会附带抗体说明书，上面有的就说明可以做，没有的就是不适合做的。
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欢迎同行交流
7楼2014-11-26 13:19:51
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-20 12:57:36
fuyuandj86: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-21 00:42:24
本来很多抗体就不同时适用于Western和免疫荧光。不过如果免疫荧光的抗体真的标记到抗原上，又和预期定位不一样，的确很可能比和预期定位一致的结果更有价值。
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慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-20 08:38:12
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-20 12:57:41
公司没说可用于免疫荧光的抗体不适用于免疫荧光的几率比较大。
不明白你老板觉得可能是惊喜的结果，怎么又不允许你验证呢？
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慎思明辨博学笃行
3楼2014-11-20 08:40:57
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haofeng0804

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-11-20 12:57:47
补个knock down实验
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4楼2014-11-20 08:45:30
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