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霍烨zz银虫 (小有名气)
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RNA提取及电泳 已有1人参与
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提取的肠道粘膜RNA，测了OD值，结果如下： 还想检测下完整性，所以跑了电泳 用的是1%琼脂糖+2ul golden view 5ul RNA + 5ul 2X RNA loading dye (65℃，变性10min） 然后110V，跑了30min，结果却是这么个样子：（上样量8ul）  不知道是出了什么问题呢？ 另，因为是要做转录组测试，所以公司对样品要求比较严格，说是跑胶必须是28S和18S两条带的比例接近2 但我有个疑问，就是转录组测序主要是针对mRNA，而mRNA在total RNA中只占1~5%，几乎都不能在胶上看到，那么电泳胶没跑好就一定意味着做不了测序吗？ 像我这种情况送样给公司，能有多大把握成功测序？ 谢谢大家了！！ |
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| 做胶的时候是有技巧的，比如你要配1%的胶，原则上你要0.2g琼脂糖加20ml TAE,但为了防止蒸发，你要加25ml的TAE，还有就是微波炉加热过程中间，可以拿出来摇匀一下，再放入微波炉，煮沸后，立即在水龙头下冲一下，迅速降温，但切忌不能在冰上冷却，不然会爆的，如果你的手可以承受这个温度，就立马倒胶，注意这两点就可以了，重点就是快 |
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