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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » real-timePCR的定量问题
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

[求助] real-timePCR的定量问题已有4人参与

接下来要做荧光定量PCR,但是我们没有测核酸浓度的仪器，只有一个紫外分光光度计，能做吗？
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即将加入研究生的大军，迷茫！
1楼2014-11-16 18:30:33
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guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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Renjingyu: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-11-18 14:05:47
我一直用分光光度计测，79ulDEPC水直接加到RNA专用比色杯里，浓度为Abs260*40*80ng/ul。挺准的啊。用eppendorf的2ul量程枪，枪头无RNA酶。注意枪头外侧不要沾上液体，里面不要有气泡。
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慎思明辨博学笃行
7楼2014-11-17 21:09:34
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匿名

用户注销 (小有名气)
★
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Renjingyu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励热心回帖交流 2014-11-16 22:21:56
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2楼2014-11-16 20:19:12
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Renjingyu: 金币+2 2014-11-17 10:24:13
理论上，紫外分光光度计也是可以测定核算浓度的，但需要的RNA的量就比Nonodrop多了，精度上也不是很准。楼主RNA很多的话，可以试试。
另外，做qRT-PCR，RNA的质量很重要，一定要跑电泳看看。
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医学&统计学
3楼2014-11-16 22:35:11
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qzddht

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
Renjingyu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-18 18:16:38
紫外分光光度计也是可以的，稀释一下就可以了，跑胶比较上样的Marker的亮度，可以大致知道浓度。。
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做最好的自己
4楼2014-11-17 14:54:18
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