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Renjingyu

金虫 (小有名气)

[求助] real-timePCR的定量问题 已有4人参与

接下来要做荧光定量PCR,但是我们没有测核酸浓度的仪器,只有一个紫外分光光度计,能做吗?
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即将加入研究生的大军,迷茫!
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Renjingyu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by qzddht at 2014-11-17 14:54:18
紫外分光光度计也是可以的,稀释一下就可以了,跑胶比较上样的Marker的亮度,可以大致知道浓度。。

紫外分光光度计需要把RNA稀释太多倍,而且RNA也容易降解,怀疑结果是否可信。
即将加入研究生的大军,迷茫!
5楼2014-11-17 16:32:51
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匿名

用户注销 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
Renjingyu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励热心回帖交流 2014-11-16 22:21:56
本帖仅楼主可见
2楼2014-11-16 20:19:12
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Renjingyu: 金币+2 2014-11-17 10:24:13
理论上,紫外分光光度计也是可以测定核算浓度的,但需要的RNA的量就比Nonodrop多了,精度上也不是很准。楼主RNA很多的话,可以试试。
另外,做qRT-PCR,RNA的质量很重要,一定要跑电泳看看。
医学&统计学
3楼2014-11-16 22:35:11
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qzddht

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
Renjingyu(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-18 18:16:38
紫外分光光度计也是可以的,稀释一下就可以了,跑胶比较上样的Marker的亮度,可以大致知道浓度。。
做最好的自己
4楼2014-11-17 14:54:18
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