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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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蝶舞623

银虫 (小有名气)

[交流] C18柱的再生

请教各位,做HPLC时,基线波动厉害,于是按照柱子说明书上的再生程序(水(含10%甲醇)——甲醇——氯仿——甲醇)冲柱子各80分钟,冲完后进样发现基线比以前稍好一些,可是却出现了拖尾现象(冲之前是没有的),难道把柱子冲坍陷了吗?请问各位是怎么回事啊,我该怎么办啊???还有听说不能用含卤素的溶剂冲柱子,有这回事吗?请老师们指点迷津,不胜感激!!!
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we-july

银虫 (小有名气)


xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):谢谢参与,呵呵,欢迎经常来交流及提供更好的信息与资源!!!
基线不好,各种浓度的甲醇或乙腈冲洗不见效果的话,要考虑排除流动相、检测器等等其他因素,没必要上来就再生柱子,除非你肯定就是柱子的原因--先换根柱子确认一下是不是柱子坏了。

一般慎用氯仿冲柱子,但是不是绝对不可以的。你用再生的方式一般不会冲塌柱子。

再生后出现拖尾现象,可能是你的流动相还没有完全把再生时的溶剂完全置换出来,所以峰形有所改变,用甲醇或乙腈再好好冲下柱子,把低极性的溶剂完全冲出来,再换回流动相试试。
3楼2008-05-13 15:10:13
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jackycheung

金虫 (小有名气)

楼主提问有问题


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
“做HPLC时,基线波动厉害”这跟“C18柱的再生”没什么关系。
如果是经常使用的液相,排除检测器的问题,可以好好冲冲柱子。问题不大的话可以使用不同梯度的甲醇、乙腈冲洗一下柱子。
也可以试试下面的方法再生:
用甲醇---水---四氢呋喃----二氯甲烷-至--四氢呋喃----水----甲醇反复清洗到你满意为止,也可用0.05M稀硫酸冲洗,再用水洗。
柱子塌陷可以拆东墙补西墙,补一下试试吧。
建议冲柱子时采用低流速。
质管
2楼2008-05-12 16:37:07
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ronaldoli198311

至尊木虫 (正式写手)

如果你在用甲醇和yi冲的时间足够长了的话  真有可能是冲塌了
4楼2008-05-20 10:08:49
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蝶舞623

银虫 (小有名气)

谢谢各位!我用各种溶剂冲过了发现仍然拖尾,而且换了柱子居然还拖,于是换了根保护柱发现居然好了!
5楼2008-05-21 16:17:04
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