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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » C18柱的再生
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蝶舞623

银虫 (小有名气)

[交流] C18柱的再生

请教各位，做HPLC时，基线波动厉害，于是按照柱子说明书上的再生程序（水（含10%甲醇）——甲醇——氯仿——甲醇）冲柱子各80分钟，冲完后进样发现基线比以前稍好一些，可是却出现了拖尾现象（冲之前是没有的），难道把柱子冲坍陷了吗？请问各位是怎么回事啊，我该怎么办啊？？？还有听说不能用含卤素的溶剂冲柱子，有这回事吗？请老师们指点迷津，不胜感激！！！
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1楼 2008-05-12 16:12:51
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we-july

银虫 (小有名气)
★
xiaohezi7844(金币+1,VIP+0):谢谢参与，呵呵，欢迎经常来交流及提供更好的信息与资源！！！
基线不好，各种浓度的甲醇或乙腈冲洗不见效果的话，要考虑排除流动相、检测器等等其他因素，没必要上来就再生柱子，除非你肯定就是柱子的原因－－先换根柱子确认一下是不是柱子坏了。

一般慎用氯仿冲柱子，但是不是绝对不可以的。你用再生的方式一般不会冲塌柱子。

再生后出现拖尾现象，可能是你的流动相还没有完全把再生时的溶剂完全置换出来，所以峰形有所改变，用甲醇或乙腈再好好冲下柱子，把低极性的溶剂完全冲出来，再换回流动相试试。
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3楼2008-05-13 15:10:13
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jackycheung

金虫 (小有名气)

楼主提问有问题

★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
“做HPLC时，基线波动厉害”这跟“C18柱的再生”没什么关系。
如果是经常使用的液相，排除检测器的问题，可以好好冲冲柱子。问题不大的话可以使用不同梯度的甲醇、乙腈冲洗一下柱子。
也可以试试下面的方法再生：
用甲醇---水---四氢呋喃----二氯甲烷-至--四氢呋喃----水----甲醇反复清洗到你满意为止，也可用0.05M稀硫酸冲洗,再用水洗。
柱子塌陷可以拆东墙补西墙，补一下试试吧。
建议冲柱子时采用低流速。
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质管
2楼2008-05-12 16:37:07
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ronaldoli198311

至尊木虫 (正式写手)
如果你在用甲醇和yi冲的时间足够长了的话  真有可能是冲塌了
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4楼2008-05-20 10:08:49
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蝶舞623

银虫 (小有名气)
谢谢各位！我用各种溶剂冲过了发现仍然拖尾，而且换了柱子居然还拖，于是换了根保护柱发现居然好了！
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5楼2008-05-21 16:17:04
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