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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 求助HPLC-ELSD测定油脂甘三酯组成的问题
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wenshan231

新虫 (小有名气)

[求助] 求助HPLC-ELSD测定油脂甘三酯组成的问题 已有2人参与

万能的亲们，我现在课题一部分是想测定市售植物油的甘三酯组成，理想方法肯定是液质啦，但是一是太贵二是质谱分析挺复杂吧，我想先用液相尝试，采用的检测器是ELSD，丙酮和乙腈梯度洗脱，买的标样是三油酸甘三酯，还买了五种饱和甘三酯的混标（C8-C16)，这些标样足够吗？
我看了很多这方面的文献，不是所有人都买了标样或者只买一种/几种，那其他峰是怎么定性定量的呢？
有几篇提到了logα与双键数n作直线，是附件里的AOCS标准里写的，这是什么意思呢，是有某种算法吗？
有没有做过的前辈，求指导啊！
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  • 附件 1 : AOCS_Ce_5b-89-2011.pdf
    • 2014-11-06 10:39:53, 189.31 K

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1楼 2014-11-06 10:39:59
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wenshan231: 金币+15, ★有帮助 2014-11-25 16:54:05
液相不怎么接触，不过你要测哪种成分，不管用外标还是内标，必须要用该成分的标品，这是肯定的。关于你说的算法的问题，只能让其他人解答了o(╯□╰)o

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-11-06 11:21:56
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sugz

至尊木虫 (著名写手)

科学家

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
液相测定TAG是比较权威的一种方法，内标定量，选择做内标的TAG是根据油脂的TAG组成而选择，有些油脂中OOO可以定量，但有的不行，需要几种TAG（所分析的油脂中不存在）一起才能定量，也更加准确。
后面你说的就是TAG的等价碳数CN=碳数-2n，即TAG分子中的总碳数减去2倍的双键数，举个例子吧，比如OOO，其等价碳数为CN=54-2X3=48，即等价碳数为48，以此类推，按照AOCS中的规定，去计算不同油脂的TAG组成。
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仰天大笑出门去，我辈岂是蓬蒿人！
3楼2014-11-06 15:04:04
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wenshan231

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sugz at 2014-11-06 15:04:04
液相测定TAG是比较权威的一种方法，内标定量，选择做内标的TAG是根据油脂的TAG组成而选择，有些油脂中OOO可以定量，但有的不行，需要几种TAG（所分析的油脂中不存在）一起才能定量，也更加准确。
后面你说的就是TA ...

找到专家了！是的，我要测的油是橄榄油，大豆油，玉米油，芝麻油等市售的这些以及饱和度高的棕榈油，您说的有的OOO可以有的需要几种，该怎么确定呢，能说的更详细些吗，我不可能每种甘三酯标样都买，只买几种的话，这几种该如何选择，又怎么根据这几种标样图确定其他峰所代表的TAG呢
等价碳数我会算的，相同CN的怎么区分呢，AOCS标准中使用的是差示折光检测器，我用的是ELSD感觉除了定量那，其他没有很大参考性吖
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4楼2014-11-06 17:44:52
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wenshan231

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2014-11-06 11:21:56
液相不怎么接触，不过你要测哪种成分，不管用外标还是内标，必须要用该成分的标品，这是肯定的。关于你说的算法的问题，只能让其他人解答了o(╯□╰)o

恩恩，但是TAG的种类有几十种，不可能每种都买，也买不到那么多种，所以我不懂的就是买不到的那些是怎么定性定量的呢~
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5楼2014-11-06 17:50:17
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by wenshan231 at 2014-11-06 17:50:17
恩恩，但是TAG的种类有几十种，不可能每种都买，也买不到那么多种，所以我不懂的就是买不到的那些是怎么定性定量的呢~...

我不做液相，但是做气相的时候测脂肪酸，直接买的是37种脂肪酸的标品，就是商家已经配好的，里面含有37种脂肪酸的。不知你要测的是否也能买这样的标品，如果能，问题就解决了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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微信公众号：食安小屋
6楼2014-11-06 19:29:58
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sugz

至尊木虫 (著名写手)

科学家

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by wenshan231 at 2014-11-06 17:44:52
找到专家了！是的，我要测的油是橄榄油，大豆油，玉米油，芝麻油等市售的这些以及饱和度高的棕榈油，您说的有的OOO可以有的需要几种，该怎么确定呢，能说的更详细些吗，我不可能每种甘三酯标样都买，只买几种的话， ...

先分析这些油脂的脂肪酸组成，根据不饱和脂肪酸居于sn-2位，饱和脂肪酸居于sn-1,3位原则，先推测一下看大概有那些TAG，在具体选择内标TAG，具体可参考国标或AOCS分析方法。
等价碳数只是HPLC和一个分类方法，等价碳数相同的TAG是无法检测分析的，这也是HPLC分析的一个弊端，进一步要分出谁是谁的话，可以做做核磁。
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7楼2014-11-07 08:44:17
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dawei0124

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by sugz at 2014-11-07 08:44:17
先分析这些油脂的脂肪酸组成，根据不饱和脂肪酸居于sn-2位，饱和脂肪酸居于sn-1,3位原则，先推测一下看大概有那些TAG，在具体选择内标TAG，具体可参考国标或AOCS分析方法。
等价碳数只是HPLC和一个分类方法，等价 ...

如果用HPLC-ELSD定量油脂中甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯的含量，好像不能用面积百分比，一酯、二酯和三酯在ELSD中的响应值不一样。选内标的话，甘油三酯的组成对其也有影响，不知道有没有权威的方法？
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孤独的守望者
8楼2016-01-14 16:00:21
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sugz

至尊木虫 (著名写手)

科学家
引用回帖:
8楼: Originally posted by dawei0124 at 2016-01-14 16:00:21
如果用HPLC-ELSD定量油脂中甘油一酯、甘油二酯和甘油三酯的含量，好像不能用面积百分比，一酯、二酯和三酯在ELSD中的响应值不一样。选内标的话，甘油三酯的组成对其也有影响，不知道有没有权威的方法？...

AOCS是最权威的，还有一个好像是欧洲的，可以参考
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仰天大笑出门去，我辈岂是蓬蒿人！
9楼2016-01-14 16:18:59
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dawei0124

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sugz at 2016-01-14 16:18:59
AOCS是最权威的，还有一个好像是欧洲的，可以参考...

AOCS有具体的标准号吗？AOCS Official Method Cd 11d-96这个只是同时测一酯和二酯的，没有三酯。
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孤独的守望者
10楼2016-01-14 16:50:33
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