应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因组DNA做模板扩增目的片段比cDND扩增得到的短
51/1返回列表
查看: 2240  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tinychan

新虫 (初入文坛)

[求助] 基因组DNA做模板扩增目的片段比cDND扩增得到的短 已有1人参与

请问各位大神有没有用基因组DNA做PCR的呀？我根据目的基因ORF进行引物设计，分别以cDNA和gDNA为模板进行扩增，发现cDNA扩增得到的片段居然比gDNA得到的片段还长，这是什么原因呀？我的实验目的主要是通过基因组DNA扩增查看目的基因的内含子和外显子分布情况,但没想到换了几次引物都得到这样的结果，现在不知道该怎么办，请各位大神指教啊~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-05 22:08:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tinychan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by stone2239 at 2014-11-06 22:54:03
你明白，倒是说呀，你测序没有？结果如何？一般通过查资料就可知道该基因是否含内含子。实验方法都是用你这样的方法，这就是最简单的方法了。
...

不好意思，说错了，是没有基因组序列。
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-07 14:32:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
基因组为模板的扩增产物测序了吗？也许只是个非目标片段
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-11-05 22:10:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tinychan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2014-11-05 22:10:57
基因组为模板的扩增产物测序了吗？也许只是个非目标片段

没有测序，我们做的是植物，没有基因组，该怎么设计引物才能提高特异性呀？请指教
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-06 14:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by tinychan at 2014-11-06 14:58:54
没有测序，我们做的是植物，没有基因组，该怎么设计引物才能提高特异性呀？请指教...

我的意思是你扩增出的产物测序了吗？比对一下，才能知道扩出的是不是你的目标序列。
赞一下 回复此楼
4楼2014-11-06 17:45:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭