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打算做qpcr 遇到一些问题 希望大家看一看
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王丹523
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打算做qpcr 遇到一些问题 希望大家看一看
已有3人参与
我有五个基因,如果我用一个模板这样去做qpcr。我不太懂溶解曲线和扩增曲线的原理。
所以我是每次做一个基因,跑一次能同时得到溶解曲线和扩增曲线?还是能够五个基因一起跑。
我不知道溶解曲线和扩增曲线是分别跑出来的还是一次跑出来的。
机子是abi7500。用的syber green takara的。
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帮我看看这个溶解qPCR曲线
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1楼
2014-11-05 12:00:00
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2楼
:
Originally posted by
bbqlhb
at 2014-11-05 13:14:59
ABI7500,有多个通道,所以可以同时测几个基因,但是最好一个基因一个基因的测,因为溶解曲线是只有一条。
你选择melting curve那个才能做出熔解曲线,更多的话请参考说明书吧。
可以五个基因一起跑,因为有不同颜色作标记,扩增曲线和溶解曲线是分别跑的。
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3楼
2014-11-05 13:40:33
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
王丹523(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流
2014-11-05 14:23:56
ABI7500,有多个通道,所以可以同时测几个基因,但是最好一个基因一个基因的测,因为溶解曲线是只有一条。
你选择melting curve那个才能做出熔解曲线,更多的话请参考说明书吧。
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2楼
2014-11-05 13:14:59
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3楼
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Originally posted by
wxk19960113
at 2014-11-05 13:40:33
可以五个基因一起跑,因为有不同颜色作标记,扩增曲线和溶解曲线是分别跑的。...
所以说 我先relative qualification 一次跑五个基因,加一个actin, 然后再跑melt curve 一次跑五个基因, 加一个actin, 数据导出分析?是这样吗?
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4楼
2014-11-05 14:16:41
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2楼
:
Originally posted by
bbqlhb
at 2014-11-05 13:14:59
ABI7500,有多个通道,所以可以同时测几个基因,但是最好一个基因一个基因的测,因为溶解曲线是只有一条。
你选择melting curve那个才能做出熔解曲线,更多的话请参考说明书吧。
我有说明说 , abi 厚厚的一本 ,上面只是说了程序的设定
我想知道一次可以跑几个melt curve, 还是每次跑一个基因做溶解曲线和扩增曲线
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5楼
2014-11-05 14:19:04
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