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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » Crispr/Cas9 基因敲除：有限稀释法（单克隆挑选）
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pypsak

金虫 (正式写手)

[交流] Crispr/Cas9 基因敲除：有限稀释法（单克隆挑选）

做细胞的基因敲除，工作量最大的应该就是转然后的阳性筛选了，首先要进行有限稀释法，这次就来分享一下这个简单量大的方法，希望大家留下宝贵的意见！

百度文库链接：http://wenku.baidu.com/view/92d9d4195acfa1c7aa00ccfb.html
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ttxs99

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1楼2014-11-05 10:55:24
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夏至1990

金虫 (小有名气)
★
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引用回帖:
55楼: Originally posted by pypsak at 2014-11-06 09:21:39
你是卡在哪了？...

筛选时候，阳性细胞剩余非常少，对照阴性细胞死完，阳性细胞基本也死完了，不知道该怎么搞了，是确保阳性细胞还在的时候，不加抗生素，让它涨起来，然后是有限稀释。还是直接消化挑单克隆，这样细胞会不会死亡完啊，我想稳筛，求指导1016902450
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56楼2014-11-06 11:22:58
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