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求助 毛状根一直诱导不出 求大神指导已有6人参与
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如题 毛状根诱导已经做了差不多两个月了,还是没什么结果,想请教一下有做过毛状根诱导的大神。我们的步骤是这样的,外植体是冬凌草,是香茶菜科的植物,菌种是在华南菌种保藏中心买的atcc11325,用ynb培养基培养出来的,诱导方法是先把叶片从外植体切下,接到培养基上黑暗预培养2d以上(培养基有用ms还有诱导愈伤组织的培养基),菌种买来后经过三次继代活化后划平板挑单菌落,摇出来后甘油保种,要侵染之前2d先活化一次,再用锥形瓶摇,接种量为百分之1,侵染时用ms培养液把其稀释到od600=0.4 加入AS母液使其终浓度为100umol/L ,侵染30min,侵染后放回原培养基共培养1d,之后就用400cef的除菌培养基除菌,但是等了两个星期以上都没有出现毛状根,不过边缘有愈伤组织生长。请问我们的实验步骤有没有问题?我们初步分析有可能是菌种问题,请问该菌株的侵染是否有种属的选择性?虚心请教,先谢谢各位了![]() |
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