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求助 毛状根一直诱导不出 求大神指导已有6人参与
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如题 毛状根诱导已经做了差不多两个月了，还是没什么结果，想请教一下有做过毛状根诱导的大神。我们的步骤是这样的，外植体是冬凌草，是香茶菜科的植物，菌种是在华南菌种保藏中心买的atcc11325，用ynb培养基培养出来的，诱导方法是先把叶片从外植体切下，接到培养基上黑暗预培养2d以上（培养基有用ms还有诱导愈伤组织的培养基），菌种买来后经过三次继代活化后划平板挑单菌落，摇出来后甘油保种，要侵染之前2d先活化一次，再用锥形瓶摇，接种量为百分之1，侵染时用ms培养液把其稀释到od600=0.4 加入AS母液使其终浓度为100umol/L ，侵染30min，侵染后放回原培养基共培养1d，之后就用400cef的除菌培养基除菌，但是等了两个星期以上都没有出现毛状根，不过边缘有愈伤组织生长。请问我们的实验步骤有没有问题？我们初步分析有可能是菌种问题，请问该菌株的侵染是否有种属的选择性？虚心请教，先谢谢各位了 |
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