24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jjsh310

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 383.8
红花: 1
帖子: 124
在线: 44.6小时
虫号: 1491148
注册: 2011-11-14
性别: MM
专业: 疫苗学

[求助] 如何高保真的扩增长约4K的DNA，不引入其他杂核苷酸已有6人参与

我有段约4K的DNA序列想扩增出来因为要翻译成蛋白所以不能引入其它的核苷酸影响翻译求大神赐教

回复此楼

» 猜你喜欢

初来乍到··

1楼2014-10-29 14:50:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

sun_in_night

木虫 (小有名气)

应助: 51 (初中生)
金币: 1706.7
红花: 11
帖子: 171
在线: 123.1小时
虫号: 1494034
注册: 2011-11-16
性别: GG
专业: 植物遗传学

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-30 14:40:46

引用回帖:

8楼: Originally posted by jjsh310 at 2014-10-29 14:59:22
嘿嘿我说的不引入新的核苷酸就是不想用载体链接。我的意思是用高保真酶扩4K的片段怕太长，扩出来的序列错误率高。因为我需要表达，所以不能出错。而且不能连接的时候引入其他核苷酸。高保真酶可以做到扩4K的 ...

一般的高保真酶能做到10k-15k只有一个碱基出错，这还是比较一般的那种。。。现在做克隆扩10k的根本不是问题，你说的1k-1.5k会出错那是指一般的酶，用来做鉴定的。一般实验室都会有专门用来做克隆的酶和一般PCR鉴定的,仔细看一下你们实验室用的酶的说明好了。
PS：还是不懂你说的“不用载体链接”什么意思，不放入载体你怎么表达你的基因呢？