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jjsh310

金虫 (小有名气)

[求助] 如何高保真的扩增长约4K的DNA,不引入其他杂核苷酸 已有6人参与

我有段约4K的DNA序列   想扩增出来   因为要翻译成蛋白所以不能引入其它的核苷酸影响翻译   求大神赐教
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初来乍到··
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jjsh310

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-10-30 11:05:29
酶到不是最重要的,在能扩出来的情况下,循环数尽可能少点,测序的时候多测几个,一般都能拿到想要的

嗯嗯,我准备用不同的酶多扩几次测序看看,实在不行再考虑其他办法。我只是听说一般扩增片段就是1到1.5k,我的4k太大了  怕错误率太高根本没办法用。谢谢您。
初来乍到··
10楼2014-10-30 11:10:39
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happydove

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-30 11:26:50
用高保真的酶是一定的,实在不行分成两段扩看看
2楼2014-10-29 15:12:14
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jjsh310

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by happydove at 2014-10-29 15:12:14
用高保真的酶是一定的,实在不行分成两段扩看看

请问分成两段怎么连接到一起呀  我不想引入新的序列     用LA酶扩增特异性强不强呀。扩增序列会不会有错误
初来乍到··
3楼2014-10-29 15:59:01
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-30 11:26:55
用高保真酶就可以了吧···
···
4楼2014-10-29 16:00:59
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