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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] DH5α转化后 提取质粒提取不出来 已有9人参与

将pet28α连接目的基因后,转化到DH5α 感受态,,  转化涂布,阴阳性对照都正常,,涂布的板子上至长出了一个菌落,,养菌后,提取质粒,提取不出来,是什么原因呢?    ----  养菌过程中都加了Kana的,浓度是50
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 593318518 at 2014-10-19 21:00:30
pET应该不是高拷贝质粒吧,不知道楼主提没提出来是怎么判断的。

在DH5α里 能够拷贝很多的吧,, 试剂盒提取的时候 在加入buffer III 的时候 和正常情况下 相差很大, 跑电泳也没有跑出来

其他重组菌用这个 试剂盒 是可以提取出来的
12
4楼2014-10-20 10:26:13
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593318518

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-10-19 23:26:02
永峰1230: 金币+3, 有帮助 2014-10-20 17:55:49
pET应该不是高拷贝质粒吧,不知道楼主提没提出来是怎么判断的。
2楼2014-10-19 21:00:30
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s_lich28

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-10-19 23:22:58
永峰1230: 金币+4, 有帮助 2014-10-20 17:55:40
经常有因为小提的kit或者试剂问题提不出质粒的,问问实验室其他最近有提质粒的人kit是不是OK,另外可以做一下菌落PCR,确认楼主的目的片段在细菌里。
There is nothing either good or bad, thinking makes it so.
3楼2014-10-19 21:48:31
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by s_lich28 at 2014-10-19 21:48:31
经常有因为小提的kit或者试剂问题提不出质粒的,问问实验室其他最近有提质粒的人kit是不是OK,另外可以做一下菌落PCR,确认楼主的目的片段在细菌里。

试剂盒是  没问题的
12
5楼2014-10-20 10:26:29
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