应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 纯化后蛋白中DNA污染检测
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 3569  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

honeywanghe

铁虫 (初入文坛)

[求助] 纯化后蛋白中DNA污染检测 已有3人参与

求教下有什么方法可以检测纯化后的蛋白中是否含有DNA污染、污染程度如何呀？
求大神指点！谢谢啦！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-15 17:15:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
honeywanghe: 金币+4, ★有帮助 2014-10-17 12:55:54
引用回帖:
4楼: Originally posted by honeywanghe at 2014-10-16 13:54:56
谢谢  我做的是蛋白酶  需要检验纯化后的蛋白酶是否有DNA污染  因为纯化过程中已经尽量减少DNA的存在了  现在的目的就是要在不影响酶活的前提下验证是否成功  是否DNA污染足够小以致可以忽略其对酶活性的影响。 不 ...

我这里假设你用大肠杆菌作为宿主菌表达你的目的蛋白，那么纯化中最大的污染源就是大肠杆菌的基因组DNA和质粒DNA
所以选一个大肠杆菌的保守基因，做一个荧光定量，可以定量得出你的蛋白核酸含量。
然后这个浓度足够低的情况下，应该可以排除核酸对你的蛋白活性的影响。
赞一下(1人) 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
6楼2014-10-16 22:58:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
个人意见，选一个宿主菌或细胞的保守基因，然后上荧光定量，如果低于某个数值，就可以认为没有了吧？
赞一下 回复此楼
行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-10-15 17:24:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

毛毛虫123321

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
honeywanghe(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-16 14:57:39
紫外分光光度计测A260 和A280  一般 A280/A260在1.5-2.0之间 蛋白纯度较高 基本无核酸
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-16 10:55:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

honeywanghe

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-10-15 17:24:11
个人意见，选一个宿主菌或细胞的保守基因，然后上荧光定量，如果低于某个数值，就可以认为没有了吧？

谢谢  我做的是蛋白酶  需要检验纯化后的蛋白酶是否有DNA污染  因为纯化过程中已经尽量减少DNA的存在了  现在的目的就是要在不影响酶活的前提下验证是否成功  是否DNA污染足够小以致可以忽略其对酶活性的影响。 不知可有什么好的建议  期待您的解答！
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-16 13:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学354求调剂 +3 101次希望 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:28 by 544594351
[考研] 298求调剂 +3 种圣赐 2026-03-28 3/150 2026-03-28 23:58 by wxiongid
[考研] 材料学硕333求调剂 +10 北道巷 2026-03-24 10/500 2026-03-28 23:06 by 无际的草原
[考研] 材料277求调剂 +7 min3 2026-03-24 7/350 2026-03-28 11:39 by xuxiang
[考研] 081200-314 +3 LILIQQ 2026-03-27 4/200 2026-03-28 09:41 by 保护地球你我做�
[考研] 0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可 +9 丹青奶盖 2026-03-26 10/500 2026-03-28 07:45 by barnett0632
[考研] 求调剂 +8 张zz111 2026-03-27 9/450 2026-03-28 03:41 by fmesaito
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕，求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 8/400 2026-03-27 19:22 by 丶风雪夜归人丶
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 292求调剂 +4 求求了收下我吧� 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:37 by zhshch
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +6 林之夕 2026-03-24 6/300 2026-03-27 08:38 by hypershenger
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 325求调剂 +3 Aoyijiang 2026-03-23 3/150 2026-03-26 20:46 by 不吃魚的貓
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] B区考研调剂 +4 yqdszhdap－ 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:51 by baoball
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭