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qingsong001

银虫 (初入文坛)

[求助] 实时定量PCR检测没有目的mRNA扩增,特异性很差

1.使用第一对引物,通常是单峰,定量PCR溶解曲线在75-80°之间,是非特异性扩增还是引物二聚体?
2. 换第二对引物,也是同样结果:通常是单峰,定量PCR溶解曲线在75-80°之间;
如何优化使出现特异性扩增?我已尝试多种优化方案,都不能扩增出目的mRNA,求助有过相似经历的道友,有何种建议可行。目的mRNA在肿瘤细胞中下调,丰度会比正常细胞降低一点
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momo12345678

新虫 (小有名气)

4楼2016-02-29 17:32:09
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