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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 物质为何不出峰？
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icecream0913

金虫 (小有名气)

[交流] 物质为何不出峰？

我从中药里分离出来的东西，点板后三个展开系统下都是一个点，用紫外扫描后只在203nm有吸收，但是进液相后不出峰，是什么原因啊？流动相用的不同比例的乙腈-水和乙腈-0.05%磷酸水，都不出峰，好郁闷啊………哪位虫子可以指点一下小妹吗？不尽感激！
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1楼 2008-04-30 22:14:23
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apple1234

铁虫 (初入文坛)
会不会是浓度太低？或者出峰时间太靠后了？你进样走了多长时间？
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2楼2008-05-01 10:56:00
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guozhiyong

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
用203nm检测的话，应该是皂苷类的东西啦，这种东西经常会这样，你很有可能是浓度太低啦
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3楼2008-05-01 13:42:06
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xy4585618

荣誉版主 (著名写手)

小木虫
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢补充！
不出峰的原因很多,除了楼上二位说得我再补充几点: 1、流动相中有机相浓度较低。解决方法，做液相时，有机相浓度先用90%的做，看出不出峰，如果出峰，就把有机相浓度降低，来提高分离度，一般情况下90%的有机相为流动相，样品应该在5分钟内出峰；如果不出峰，那就要根据样品的性质来加酸或碱，调流动相的PH值！
2、色谱柱的原因：检查一下色谱柱是不是有问题（测一下柱效，看看理论塔板数、峰形及分离度），看色谱柱是不是什么特殊的色谱柱，比如说是氨基柱、氢基柱、手性柱等。3、就是仪器的原因：检查色谱柱两端是否接好；看灯的能量是否足够；水和有机溶剂瓶中的滤头是否堵塞（这个原因的可能性较大，如果滤头堵塞，会导致进入色谱柱的有机相比例发生变化，最后导致样品无峰。解决办法就是滤头用有机溶剂超声）
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是也罢，非也罢，是是非非争个啥。河东河西三十年，对的错啦，错的对拉！得也罢，失也罢，患得患失误年华。凡事该做尽管做，得了更好，失也没啥！
4楼2008-05-01 14:10:50
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一帘忧梦

银虫 (正式写手)
学习！！！！！！！！！！！！！！！
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5楼2008-05-02 01:14:48
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cpugym

铜虫 (初入文坛)
皂苷类的物质紫外检测效果不是很好，可以考虑用ESLD检测
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6楼2008-05-10 01:54:15
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s1d2w2

木虫 (正式写手)
专业。十分佩服
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7楼2008-05-10 11:17:06
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yaosir

铜虫 (初入文坛)
学习了！！呵呵
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8楼2008-05-10 11:34:56
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lassa

金虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢指教！
我的经验：
１．浓度太低，紫外吸收弱，建议增大样品浓度。
２．如果是等度洗脱的话，如果不出峰，建议改用梯度洗脱。
２０３基本都是皂苷吧？梯度洗脱比较容易出峰。

[ Last edited by lassa on 2008-5-10 at 12:01 ]
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9楼2008-05-10 12:00:38
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一帘忧梦

银虫 (正式写手)
学习 前辈们多发点帖子
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10楼2008-05-15 02:06:30
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