| 查看: 1776 | 回复: 5 | ||
jiaoxiayoulu新虫 (小有名气)
|
[求助]
载体构建后诱导不表达 已有2人参与
|
|
各位虫友，我有个问题一直困扰我：我在将目的基因插入表达载体中时，我的目的基因扩增引物是这样的：上游引物GGGGTACC -gcATGTCTAACCAAATATACTCAGCG 下游引物：ACATGCATGC -TCCGATAATGTTCCAAAGGAAGC 这个构建的载体是做基因敲除后回补用的，我想问的是上游引物中在酶切位点和起始密码子之间多了两个碱基gc对表达有影响吗？我用的载体是Pyes2，启动子是半乳糖诱导表达的gal1！但是诱导后SDS-PAGE后含有表达载体的酵母和含有空载体的酵母对照后条带都一样！这样是否能说明我的表达载体没有表达呢？做了快一个月了还没做出来，快毕业了！求指教啊 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有169人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 真核表达载体构建成功但是不表达目的蛋白，大家帮忙分析一下原因谢谢
已经有9人回复
- pgex 4t-1载体 无须诱导
已经有8人回复
- PET28载体的T7启动子是T7还是T7lac启动子？表达时需不需要IPTG诱导？
已经有6人回复
- 融合蛋白表达只出现前半部分蛋白条带
已经有13人回复
- 原核表达载体蛋白诱导
已经有18人回复
- 穿梭载体如果直接插入目的基因能不能表达？
已经有3人回复
- 原核表达载体构建，测序不成功
已经有20人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 【求助/交流】表达载体pCAMBIA1304表达顺序看不懂
已经有12人回复
- 【求助/交流】大家有用到过什么过表达的载体吗？需要诱导剂诱导吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】目的片段与载体连接不上
已经有16人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】表达载体构建不成功的原因
已经有27人回复
- 【求助/交流】诱导pkd46质粒表达不出目的蛋白
已经有12人回复
2楼2014-10-13 11:25:08
jiaoxiayoulu
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 38.6
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 96
- 在线: 36.7小时
- 虫号: 2102897
- 注册: 2012-11-02
- 专业: 微生物遗传育种学
3楼2014-10-13 14:22:12
4楼2014-10-13 16:04:50
小冀-
版主 (著名写手)
- 应助: 713 (博后)
- 贵宾: 3.033
- 金币: 11446.9
- 散金: 1055
- 红花: 82
- 帖子: 2509
- 在线: 445.9小时
- 虫号: 1521695
- 注册: 2011-12-03
- 性别: GG
- 专业: 生物信息学
- 管辖: 微生物
5楼2014-10-20 10:29:52
jiaoxiayoulu
新虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 38.6
- 散金: 5
- 红花: 1
- 帖子: 96
- 在线: 36.7小时
- 虫号: 2102897
- 注册: 2012-11-02
- 专业: 微生物遗传育种学
6楼2015-02-04 11:07:29
5