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曾经走过

金虫 (初入文坛)

[求助] 做酵母双杂在二缺培养液中酵母摇成球状,为什么呀? 已有3人参与

本人现在在做酵母双杂,将AD和BK的载体导入后,在二缺板上长了,然后想在二缺液中摇起来点四缺板,但是酵母聚集成了球状,不是分散的,有哪位见过这种情况??急求
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是污染了,酵母培养物是很均匀的分散开的

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-10-11 09:21:22
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曾经走过

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-10-11 09:21:22
有可能是污染了,酵母培养物是很均匀的分散开的

好奇怪的,我同时做了几个基因,只有这个基因的对照和实验组是这样,其他没问题
3楼2014-10-11 09:34:24
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 曾经走过 at 2014-10-11 09:34:24
好奇怪的,我同时做了几个基因,只有这个基因的对照和实验组是这样,其他没问题...

重新做一遍就知道了

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-10-11 10:56:32
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l1409358961

捐助贵宾 (知名作家)


商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
建议参考德国的酵母双杂交系统

特点和优点:
1.  可以筛选不同蛋白-蛋白之间相互作用的强度;
2.  利用铜诱导的CUP1/ACE1系统能更有效的检测体内蛋白相互作用;
3.  利用铜抗性这种严格的筛选,会出现很少的假阳性;
4.  利用GFP这种绿色荧光蛋白的报告基因,筛选阳性菌株可以节省大量的时间;
5.  筛选阳性菌株不需要外部酶底物,如X-Gal;
6.  适合高通量的筛选分析。
产品介绍:
        酵母双杂交系统是一种用于筛选体内蛋白-蛋白之间相互作用的方法,它依赖于DNA结合结构域和DNA激活结构域的分离,并将这两个结构域基因分别与两个蛋白基因融合在一起,如果两种蛋白能够相互作用,就会使这两个结构域重组成一个有活性的转录因子复合物,这样,就会使报告基因得以表达。
MoBiTec的ACE1双杂交系统是一个强大的工具,它可以用于新基因的发现和功能分析,而且可以有效的鉴别体内蛋白-蛋白的作用。它将铜诱导的转录因子ACE1和铜抗性CUP1基因与作为报告基因绿色荧光蛋白GFP基因结合起来。两种相互作用的蛋白分别与ACE1的DNA结合结构域和DNA激活结构域相融合,从而使我们可以通过下面的方法筛选:1.在含铜的培养基上生长的细胞;2.依赖铜表达的强荧光GFP可以通过紫外光检测到。
因此,这种新技术,可以很有效的通过一步法筛选可能的阳性表达,即在含有铜的培养基上生长并发出绿色荧光的菌株。它是一种快速、高灵敏度和更值得信赖的检测方法。不断改变铜浓度还可以筛选出不同蛋白之间相互作用的强度。
            
本网链接
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7590557&view=mp
5楼2014-10-13 08:23:25
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qurande

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
染杂菌了吧,做个镜检骗子看看
6楼2014-10-13 13:24:49
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qurande

金虫 (小有名气)

7楼2014-10-13 13:25:02
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milamiya

禁虫 (小有名气)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

8楼2014-10-13 14:12:34
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曾经走过

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by qurande at 2014-10-13 13:25:02
片子

3q
9楼2014-10-21 13:10:07
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曾经走过

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by milamiya at 2014-10-13 14:12:34
摇的时候时候如果转速在50-100rpm,属于正常~

我们一般150-200rpm哎
10楼2014-10-21 13:11:02
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