| 查看: 3031 | 回复: 10 | ||
[求助]
高CG重复和连续序列怎么P出来 已有3人参与
|
|
1. 以下是我打算P的序列，引物设计决不是问题，但就是P不出来，一次P出来了大小还不对，求帮助 ttaaccctagaaagataatcatattgtgacgtacgttaaagataatcatgcgtaaaattgacgcatgtgttttatcggtctgtatatcgaggtttatttattaatttgaatagatattaagttttattatatttacacttacatactaataataaattcaacaaacaatttatttatgtttatttatttattaaaaaaaaacaaaaactcaaaatttcttctataaagtaacaaa 2. 下面这一段也是要P的，目的应该有800bp左右，但就是总P出300bp左右的条带。检查引物特异性，也没得说，好的很 cgttacataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgtcaatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatgggtggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtacgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattgtgcccagtacatgaccttatgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatggtcgaggtgagccccacgttctgcttcactctccccatctcccccccctccccacccccaattttgtatttatttattttttaattattttgtgcagcgatgggggcggggggggggggggggcgcgcgccaggcggggcggggcggggcgaggggcggggcggggcgaggcggagaggtgcggcggcagccaatcagagcggcgcgctccgaaagtttccttttatggcgaggcggcggcggcggcggccctataaaaagcgaagcgcgcggcgggcgggagtcgctgcgacgctgccttcgccccgtgccccgctccgccgccgcctcgcgccgcccgccccggctctgactgaccgcgttactcccacaggtgagcgggcgggacggcccttctcctccgggctgtaattagctgagcaagaggtaagggtttaagggatggttggttggtggggtattaatgtttaattacctggagcacctgcctgaaatcactttttttcaggttgg。非常高的连续G或C。 |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有249人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有8人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何将两段同样的序列进行无缝的串联重复连接？
已经有10人回复
- 染色体步移结果该如何解释？
已经有10人回复
- PCR有时能出来带有时出不来
已经有24人回复
- 已知预测的mRNA序列，如何获取基因序列以备后续设计引物？具体步骤如何？
已经有5人回复
- 质粒PCR产物片段大小问题
已经有15人回复
- 3‘RACE序列比对了居然是26S核糖体RNA基因 这是怎么回事 求指点 ！！！！！万分感谢
已经有25人回复
- 为什么同样的PCR条件结果重复不出来呢，P出来一次之后就P不出来了
已经有22人回复
- 请问设计引物前为什么要进行同源性比较？？
已经有15人回复
- 用基因组DNA进行PCR怎么设计引物啊
已经有10人回复
- 如何通过设计引物，插入三个新的DNA碱基
已经有4人回复
- PCR酶、模板、dNTP换了以后P出来的目的条带很少，在目的条带上有一团很亮，是为什么？
已经有13人回复
- 已经得到目的基因的全长，现在要PCR将目的基因全长P出来，如何设计引物？谢谢
已经有12人回复
- PCR引物退火温度怎么计算？
已经有3人回复
- 定点突变出现的问题出现重复序列
已经有24人回复
- 亚硝酸盐氧化还原酶基因nxrA怎么做PCR才能P出来啊？
已经有7人回复
- 怎样确定合适的Tm值？
已经有14人回复
- 如何扩展高度重复序列
已经有4人回复
- 如何根据保守序列将基因片段克隆出来
已经有16人回复
- PCR重复不出来
已经有20人回复
- PCR高手请进，小女子有事相求，我刚来金币不要嫌少啊，我只有这么多啊，全给你了
已经有20人回复
- 知道了引物序列怎么看它好不好
已经有6人回复
- 如何向NCBI提交序列【已搜无重复】
已经有92人回复
jonew
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 4831.7
- 散金: 74
- 红花: 3
- 帖子: 648
- 在线: 163.6小时
- 虫号: 1983651
- 注册: 2012-09-07
- 性别: GG
- 专业: 拓扑学
2楼2014-10-05 22:39:34
wshi85
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1495.7
- 散金: 8
- 红花: 5
- 帖子: 687
- 在线: 213.9小时
- 虫号: 584125
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
3楼2014-10-06 17:00:44
4楼2014-10-07 00:53:52
jonew
木虫 (正式写手)
- 应助: 21 (小学生)
- 金币: 4831.7
- 散金: 74
- 红花: 3
- 帖子: 648
- 在线: 163.6小时
- 虫号: 1983651
- 注册: 2012-09-07
- 性别: GG
- 专业: 拓扑学
5楼2014-10-07 11:17:09
syn1985
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 3
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2765.5
- 散金: 60
- 红花: 3
- 帖子: 578
- 在线: 273.2小时
- 虫号: 463029
- 注册: 2007-11-19
- 性别: MM
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
陈日飞(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-10-07 18:27:21
陈日飞: 金币+27, ★★★很有帮助, 咨询了其他教授，也是这种办法，我试试 2014-10-08 15:17:21
感谢参与，应助指数 +1
陈日飞(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-10-07 18:27:21
陈日飞: 金币+27, ★★★很有帮助, 咨询了其他教授，也是这种办法，我试试 2014-10-08 15:17:21
|
我猜你这是链霉菌的模板 一定要用GC buffer TAKARA有两种： GC I 和GC II， 先用I试一下， 实在不行再用II，DMSO是必须加的，浓度是50ul体系里面加2.5的DMSO 还有就是退火温度要低 （我最低到40度） 我做过模板GC含量都在80以上的 就要这些方法 引物随便设 基因扩出来基本都是一条目的条带 扩过12Kb的高GC片段 一样好用 祝好运 |
6楼2014-10-07 11:32:10
wshi85
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1495.7
- 散金: 8
- 红花: 5
- 帖子: 687
- 在线: 213.9小时
- 虫号: 584125
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
7楼2014-10-08 16:01:48
jwang1987
木虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 3677.3
- 散金: 10
- 红花: 2
- 帖子: 72
- 在线: 172.1小时
- 虫号: 1338081
- 注册: 2011-07-05
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
8楼2014-10-08 17:00:39
9楼2014-10-09 16:14:33
wshi85
木虫 (正式写手)
- 应助: 16 (小学生)
- 金币: 1495.7
- 散金: 8
- 红花: 5
- 帖子: 687
- 在线: 213.9小时
- 虫号: 584125
- 注册: 2008-08-01
- 性别: GG
- 专业: 遗传学研究新技术与方法
10楼2014-10-10 09:18:01
