【答案】应助回帖

11楼2014-09-30 13:32:13

kaven186

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老师说的不错的只要流动相用的好都可以用的。你要知道一般色谱柱公司做技术交流的时候，都是说的色谱柱固定相，很少有人说流动相的。原因是流动相复杂，一般的人搞不定，搞得定人做流动相的讲座都是要收钱的。

广州

12楼2014-09-30 14:27:55

shanshui7163

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感谢参与，应助指数 +1

一次进样也不要很多药品，先了解药品的理化性质，再选择合适的柱子、合适的流动相、合适的梯度，先做好准备工作，再上机分析不迟。

13楼2014-09-30 16:00:59

archbishop

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★ ★
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费姚永芬: 金币+2, 谢谢应助交流 2014-10-03 09:03:24

C18有很多种。要是都一样开发那么多种干什么？一定要选用和既有实验条件或者标准同种类的色谱柱，如果实验条件没有明确说明那你就只能随便挑一根了。

雲幕低垂映桂子，江月留白問柳心。

14楼2014-10-02 14:13:05

wo的海宝圆圆

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6楼: Originally posted by xu542980972 at 2014-09-29 22:19:02
为梯度洗脱～
比方说0-30分钟，流动相A从0～70%

这个梯度洗脱，我怎么找不到建立方法的时候去哪里设置~择比方说0-30分钟，流动相A从0～70%，还是我在做的时候自己手动操作呢

15楼2014-10-02 15:07:32

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3楼: Originally posted by 赈早见琥珀主 at 2014-09-29 17:24:25
C18基本够用了。走一个大梯度，有机相比例从5%提到100%，只要有紫外吸收都能给做出来，就是分离度，峰形可能会不好。

这个梯度洗脱，我怎么找不到建立方法的时候去哪里设置~择比方说0-30分钟，流动相A从0～70%，还是我在做的时候自己手动操作呢

16楼2014-10-02 15:07:42

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9楼: Originally posted by 馒头爱生物 at 2014-09-30 11:17:30
C18柱子有很多种，不过你说一般的应该就是最常规的那种吧。
感觉楼主应该是新手，没做过这方面吧，所以实验细节上应该有很多东西都需要学习，
如果药品太珍贵的话，建议你先拿个标准品做做试试，摸索一下条件，避 ...

是啊，从来没接触过~条件我只知道个大概~标准品的梯度稀释我都不知道怎么弄，真是好着急

17楼2014-10-02 15:08:40

wo的海宝圆圆

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10楼: Originally posted by tanxintong at 2014-09-30 12:37:44
药品能有多贵。买个10mg可以用一年了。反向c18柱。最平常不过的柱子了，实验室随便拿一根就能做没问题，你老师说的很对

亲，你说的是你买的药品吧，我一次都要用几十mg，一共买了200多mg，还好多钱。。。。不过还是谢谢你~我先摸索摸索，要是用完了，我也只能让老师重新给买了。。。。

18楼2014-10-02 15:10:24

klicking

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16楼: Originally posted by wo的海宝圆圆 at 2014-10-02 15:07:42
这个梯度洗脱，我怎么找不到建立方法的时候去哪里设置~择比方说0-30分钟，流动相A从0～70%，还是我在做的时候自己手动操作呢...

建议找个熟悉仪器的带带你 Agilent的仪器只设一行为等度第一行下顺着设为梯度（流速、比例、压力设置表中，应该是在泵的板块）；Waters的则是有等度和梯度选择的，设置原理同Agilent的；这两个都会了其它的大同小异，岛津的貌似设置还是比较合理的，都有设梯度变化的，找不到可以请教一下熟悉仪器的，实在不行搬出软件使用说明书。

归零

19楼2014-10-03 09:12:30

Timbers59

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【答案】应助回帖

只能告诉你，说所有C18柱的分离效果都一样的就是个二把刀，懂得很有限，实践经验不是一般的缺乏。

20楼2014-10-03 09:47:45