| 查看: 1453 | 回复: 0 | ||
ddz_19897金虫 (正式写手)
|
[求助]
pEGFP-N1空载体用xhoI、NheI单酶切或者双酶切都切不开？
|
|
我最近在做一个实验，把目的基因从已有载体上切下来，连到新的载体上，遇到一些问题，求助于各位： 1. pEGFP-N1空载体大小是4.7kb，跑胶可以看到两条带，一条在实际大小位置，亮度很低，另一条在2kb多，很亮。 2. pEGFP-N1空载体用xhoI、NheI单酶切或者双酶切都切不开或者酶切效率特别低，切完跑胶发现条带与未切的几乎一样。 3. 回收实际大小位置较暗的条带，测浓度只有3ng/ul。回收目的基因测浓度15ng/ul，连接后转化涂板没有长菌。 根据以上情况，我想求助的问题是：1. 载体跑出来的条带是正常的吧？ 2. 不论是单酶切还是双酶切，如果能切开，实际大小位置的条带应该更亮，对吗？ 3. 没有长菌是说明回收的条带是切开了吗？ 不甚感激。 |
回复此楼» 猜你喜欢
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有160人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
-
透明质酸酶的作用机制：如何实现药物递送
已经有0人回复
-
爱思维尔旗下LWT投稿
已经有9人回复
-
替拉扎明为缺氧选择性细胞毒药物研究提供新思路
已经有0人回复
-
拉坦前列腺素(Latanoprost)：前列腺素F2α衍生物如何成为青光眼一线用药
已经有0人回复
-
卟啉家族中的明星分子：MESO-四(3,5-二溴-4-羟基苯基)卟啉的性质与制备
已经有1人回复
-
宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫
已经有0人回复