| 查看: 1491 | 回复: 0 | ||
ddz_19897金虫 (正式写手)
|
[求助]
pEGFP-N1空载体用xhoI、NheI单酶切或者双酶切都切不开？
|
|
我最近在做一个实验，把目的基因从已有载体上切下来，连到新的载体上，遇到一些问题，求助于各位： 1. pEGFP-N1空载体大小是4.7kb，跑胶可以看到两条带，一条在实际大小位置，亮度很低，另一条在2kb多，很亮。 2. pEGFP-N1空载体用xhoI、NheI单酶切或者双酶切都切不开或者酶切效率特别低，切完跑胶发现条带与未切的几乎一样。 3. 回收实际大小位置较暗的条带，测浓度只有3ng/ul。回收目的基因测浓度15ng/ul，连接后转化涂板没有长菌。 根据以上情况，我想求助的问题是：1. 载体跑出来的条带是正常的吧？ 2. 不论是单酶切还是双酶切，如果能切开，实际大小位置的条带应该更亮，对吗？ 3. 没有长菌是说明回收的条带是切开了吗？ 不甚感激。 |
回复此楼» 猜你喜欢
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有219人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
-
科研人必读：新一代 KRAS G12C 抑制剂 Olomorasib 的研究进展
已经有0人回复
-
BT-11（Omilancor）研究化合物全解析：从分子结构到实验应用要点
已经有0人回复
-
富马酸贝达喹啉：二芳基喹啉类工具化合物的化学特征
已经有0人回复